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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CP934633 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒 | Providencia alcalifaciens | CP934633 |
產(chǎn)品及特點:
本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分?,F(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術(shù)將對食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品,它具有下列特點:
1. 一管式操作,用戶只需要提供樣品即可。
2. 根據(jù)大豆熱休克蛋白基因保守區(qū)域設(shè)計引物,能專一性檢測出樣品中的大豆成分,但不能檢測其他非大豆成分。
3. 快速,整個檢測過程(按一個樣品計)所需時間僅為 2.0 小時。
4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀,無需配置貴重儀器設(shè)備。
5. 對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%,對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL。
6. 本只能用于科研,足夠 50 次 40uL 體系的常規(guī) PCR。
PCR反應(yīng)五要素:
產(chǎn)品僅供科研使用參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子*很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
產(chǎn)品特征:
產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強:采用熱啟動酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,起峰快,效率高。產(chǎn)品僅供科研使用
3,3-Dimethylacrylic acid 541-47-9 中文名:千里光酸 分子式:C5H8O2 兔子緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Campsiketalin 93675-96-8 中文名: 分子式:C10H20O4 Rat von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 大鼠性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒
Macranthoin G 159934-13-1 中文名:灰氈毛忍冬素G 分子式:C26H26O12 Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 人β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
5-O-Ethylcleroindicin D 488138-32-5 中文名: 分子式:C10H16O4 HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA試劑盒人脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-Hydroxymethyl-2-furoic acid 6338-41-6 中文名:5-羥甲基-2-糠酸 分子式:C6H6O4 組織ITK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
奈瑟菌通用型(NM-U)核酸檢測試劑盒 48T 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 中文名:3-乙酰基-5α-雄烷二醇 分子式:C21H34O3
納米二氧化鈦 Ribavirin 36791-04-5 中文名:利巴韋林 分子式:C8H12N4O5
莫氏立克次體(RM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 3-Amino-3-phenylpropionic acid 中文名:C9H11NO2 分子式:C9H11NO2
膜聯(lián)蛋白5 英文名稱: Annexin 5 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANXA-5 3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 中文名: 分子式:C29H48O2
膜聯(lián)蛋白2 英文名稱: Annexin 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANXA-2 Otophylloside B 中文名:青陽參苷B 分子式:C49H78O16
瑞-吉染色劑 100ml 3-Amino-3-phenyl-1-propanol 14593-04-5 中文名:3-氨基-3-苯基-1-丙醇 分子式:C9H13NO 度:98.0%
軟水硬度測定試劑盒 Water hardness determination kit Physapruin A 155178-03-3 中文名: 分子式:C28H38O7 度:96.5% 關(guān)鍵詞: 毒性; 酸漿屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
軟骨糖蛋白 39(YKL-40) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ondansetron 99614-02-5 中文名:昂丹司瓊 分子式:C18H19N3O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
乳鐵蛋白( Lactoferrin ) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 3-Amino-2-naphthoic acid 5959-52-4 中文名:3-氨基-2-萘甲酸 分子式:C11H9NO2 度:98.0%
乳糖 100g 3-Amino-2,6-piperidinedione hydrochloride 24666-56-6 中文名: 分子式:C5H9ClN2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒22-Dehydroclerosteryl acetate 中文名: 分子式:C31H48O2 度:93.0% 兔環(huán)氧化酶-1(rabbit COX-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Pregnenolone 中文名:孕烯醇酮 分子式:C21H32O2 度:98.5% 兔核因子κ B 英文名稱: Rabbit Nuclear factor κB 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NFkB
Chlorotetracycline 57-62-5 中文名:金霉素 分子式:C22H23ClN2O8 兔骨保護(hù)素<破骨細(xì)胞抑制因子> 英文名稱: Rabbit Osteoprotegerin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: OPG
Levodopa 59-92-7 中文名:左旋多巴 分子式:C9H11NO4 兔血小板活化因子 英文名稱: Rabbit Platelet Activating Factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PAF
Nevirapine 129618-40-2 中文名:奈偉拉平 分子式:C15H14N4O 兔蛋白激酶A 英文名稱: Rabbit Protein Kinase A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PKA
使用方法:
一、產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。