冷凍保存細胞之方法？
大鼠內(nèi)臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat FatPrimaCell: Normal Visceral Fat Cells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細大鼠內(nèi)臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat FatPrimaCell: Normal Visceral Fat Cells說明書！

大鼠內(nèi)臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat FatPrimaCell: Normal Visceral Fat Cells

     內(nèi)臟是指在體腔內(nèi)，借管道直接或間接與外界相通的器官的總稱。主要包括人體胸腹部內(nèi)臟器官的分布：*、膽囊、胃、腎、小腸、脾、直腸、十二指腸、胰、輸尿管、卵巢、膀胱、子宮。其中，大鼠內(nèi)臟脂肪細胞主要存在于結(jié)締組織中，能夠合成和貯存脂肪。成熟的脂肪細胞呈圓形，胞漿內(nèi)富含脂滴。脂肪細胞在脂類代謝，能量平衡以及抵等方面起重要作用，與，、、乳癌等多種生理疾病密切相關(guān)。 利用本公司試劑盒中提供的內(nèi)臟組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的內(nèi)臟組織能使得內(nèi)臟組織中脂肪細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將脂肪細胞分離開來。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠內(nèi)臟脂肪細胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以*程度地降低所培養(yǎng)的脂肪原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠內(nèi)臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的內(nèi)臟脂肪細胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠內(nèi)臟脂肪細胞組織解離液（3×1ml） （2）大鼠內(nèi)臟脂肪細胞組織處理緩沖液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠內(nèi)臟脂肪細胞成纖維抑制劑（1ml（500X）） （4）大鼠內(nèi)臟脂肪組織洗液（5 x 100 ml） （5）大鼠內(nèi)臟脂肪細胞生長因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）大鼠內(nèi)臟脂肪細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x 100ml） （7）大鼠內(nèi)臟脂肪組織預(yù)備液（1 x 100 ml） （8）大鼠內(nèi)臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度?？萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標準。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠內(nèi)臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat FatPrimaCell: Normal Visceral Fat Cells對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

APCS Others Rat 大鼠 Serum amyloid P compone / APCS / SAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 漢黃芩苷(標準品)Wogonoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

HeLa 人細胞漢黃芩素(標準品)Wogonin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

JEG-3人細胞 JEG-3 human choriocarcinoma cells MEM(GIBCO)+10%FBS蒿本內(nèi)酯（標準品）Ligustilide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CD70 Protein Human 重組人 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽)和厚樸酚(標準品)Honokiol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

大鼠神經(jīng)皮質(zhì)細胞(RNc)(1×106) SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人*癌細胞 Human和厚樸酚（標準品）Honokiol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

TNFSF8 Protein Human 重組人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽)鉺標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3Erbium standard

大鼠背部脊髓神經(jīng)元(RDSCI)(1×106) Hela, 人細胞系 Human金標準溶液(100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液)質(zhì)量規(guī)格：100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液Gold solution

斑馬魚尾鰭細胞;AB.9鐵標準溶液（1000mg/L,溶劑：5%鹽酸）質(zhì)量規(guī)格：1000mg/L,溶劑：5%鹽酸 Iron solution

BTN3A3 Others Human 人 BTN3A3 人細胞裂解液 (陽性對照) 鐵標準溶液（500mg/L,溶劑：1%鹽酸）質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：1%鹽酸 Iron solution

原代成纖維細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml鐵標準溶液（100μg/mL(20°C)，基體:5%HCl）質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL(20°C)，基體:5%HCl Iron Standard

人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SK-N-SH莫諾苷質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標準品Morroniside

HepG2.2.15細胞，表達HBV病毒的人肝細胞 小鼠細胞,MFC細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO牡荊素(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Vitexin

MG-63(人細胞) 5×106cells/瓶×2牡荊素葡萄糖苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Glucosyl-vitexin

Promocell C-23060 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium, 骨骼肌細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml牡荊素鼠李糖苷（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品vitexin-2″-o-rhamnoside

胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)米卡芬凈鈉質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRMicafungin sodium

大鼠內(nèi)臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒 Rat FatPrimaCell: Normal Visceral Fat CellsSIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙二shēng huà shì jì容量：50毫升

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B4膽醋 Cholic ccid 1981/2/4

Bel-7402細胞，人細胞 人胚纖維細胞系,HEF細胞 大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1羥基脲 Hydroxyurea (≥98%, TLC, powder) 127-07-1 1G 通用試劑

KU812(人外周血嗜堿性細胞) 5×106cells/瓶×2T1NO肉湯shēng huà shì jì容量：2～8℃150毫升

Promocell C-28011 Mesenchymal Stem CellAdipogenic Differe. Medium, 間充質(zhì)干細胞成脂分化培養(yǎng)基(即用型) 100mlD-Ribose 10g/25g/50g/100g Amresco 0671

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。復(fù)旦細胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細胞僅供科研使用。