冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Intestinal PrimaCell: Normal Intestinal Macrophages冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Intestinal PrimaCell: Normal Intestinal Macrophages說明書！

大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Intestinal PrimaCell: Normal Intestinal Macrophages

     腸指的是從胃幽門至肛門的消化管。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。其中，腸巨噬細(xì)胞及腸上皮細(xì)胞是腸道屏障的重要組成部分，它們功能的穩(wěn)定對(duì)維持腸道屏障功能具有重要作用。腸道屏障受損時(shí)，各自的生理功能也會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的改變。大鼠腸巨噬細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。    利用本公司試劑盒中提供的腸組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的腸組織能使得腸組織中巨噬細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將腸巨噬細(xì)胞分離開來。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠腸巨噬細(xì)胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以*程度地降低所培養(yǎng)的巨噬原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的腸巨噬細(xì)胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠腸巨噬細(xì)胞組織解離液（3×1ml） （2）大鼠腸巨噬細(xì)胞組織處理緩沖液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠腸巨噬細(xì)胞成纖維抑制劑（1ml（500X）） （4）大鼠腸巨噬組織洗液（5 x 100 ml） （5）大鼠腸巨噬細(xì)胞生長因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）大鼠腸巨噬細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x 100ml） （7）大鼠腸巨噬組織預(yù)備液（1 x 100 ml） （8）大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Intestinal PrimaCell: Normal Intestinal Macrophages對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL環(huán)草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Siduron質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

U-937人組織細(xì)胞細(xì)胞 Cell lymphoma cells in human tissue U-937 RPMI-1640+10%FBS西瑪津(標(biāo)準(zhǔn)品)Simazine質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

FGF7 Protein Human 重組人 FGF7 / FGF-7 / KGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)西瑪津標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%)Simazine solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5%

2V6.11(人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%) Phoxim solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%

人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431]辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)Phoxim solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%

CLEC14A Others Mouse 小鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 頭孢哌酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Cefoperazone Acid

倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6G質(zhì)量規(guī)格：BSRhodamine 6G

IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 維多利亞藍(lán)B,堿性藍(lán) 26質(zhì)量規(guī)格：BSVictoria blue B

WM451, 人細(xì)胞考馬斯亮藍(lán)R250質(zhì)量規(guī)格：BSBrilliant Blue R

HPB-ALL細(xì)胞，T細(xì)胞細(xì)胞 人細(xì)胞高轉(zhuǎn)移亞系,PC-3M 1E8細(xì)胞 人成纖維細(xì)胞總RNAHCF NA考馬斯亮藍(lán)G250質(zhì)量規(guī)格：BSBrilliant Blue G

家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S1 胚，HFL-I細(xì)胞 IEC-6細(xì)胞，大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞檸檬酸三丙酯(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Tripropyl Citrate

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2BN-丁基苯磺酰胺(>98.0%(HPLC)(N))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)N-Butylbenzenesulfonamide

CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200RLa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) D-(+)-樟腦(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(+)-Camphor

原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml阿卡波糖十三醋酸酯質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Acarbose Tridecaacetate

CD38 Others Rabbit 兔 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 檸檬苦素，黃柏內(nèi)酯(橙皮提取) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,橙皮提取Limonin

大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Intestinal PrimaCell: Normal Intestinal MacrophagesC2C12, 小鼠肌原細(xì)胞酸鋇shēng huà shì jì容量：RT500毫升

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細(xì)胞 COS-7(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞)姆沙伯 W AW ChroMosorb W cW;

人細(xì)胞;CNE-2Z重蒸酚 () Phenol 108-95-2 250ML 通用試劑

DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氫-鉀ATP酶測(cè)試盒50支/包RT

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1(DNA高分子量標(biāo)準(zhǔn))

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。