冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Ovarian PrimaCell: Normal Ovarian Epithelial Cells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Ovarian PrimaCell: Normal Ovarian Epithelial Cells說明書！

大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Ovarian PrimaCell: Normal Ovarian Epithelial Cells

     卵巢是雌性動物的生殖器官。卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。其中，大鼠卵巢上皮細(xì)胞分離自正常大鼠卵巢組織，卵巢上皮細(xì)胞主要功能：（1）上皮細(xì)胞能分泌激素，刺激卵細(xì)胞分化成熟。（2）細(xì)胞能分泌介質(zhì)，參與反應(yīng)。人卵巢上皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。 利用本公司試劑盒中提供的卵巢組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的卵巢組織能使得卵巢組織的上皮細(xì)胞一些功能特性發(fā)生改變，從而將卵巢上皮細(xì)胞分離開來。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠卵巢上皮細(xì)胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以*程度地降低所培養(yǎng)的卵巢上皮原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的卵巢上皮細(xì)胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠卵巢上皮細(xì)胞組織解離液 (3×1ml) （2）大鼠卵巢上皮細(xì)胞組織處理緩沖液 ( 100ml) （3）FibrOutTM大鼠卵巢上皮細(xì)胞成纖維抑制劑(1ml（500x）) （4）大鼠卵巢上皮組織洗液(5 x 100 ml) （5）大鼠卵巢上皮細(xì)胞生長因子（1ml500x）及血清（5x10ml） （6）大鼠卵巢上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 100ml) （7）大鼠卵巢上皮組織預(yù)備液 (1 x 100 ml) （8）大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Ovarian PrimaCell: Normal Ovarian Epithelial Cells對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

CL-0299NCI-H460(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2黃芪皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)Astragaloside I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞黃芪皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)Astragaloside II質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T 人卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL黃芪皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)Astragaloside III質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞黃芪總皂苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Astragaloside質(zhì)量規(guī)格：UV≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CTF1 Others Human 人 Cardioophin-1 / CTF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 黃杞苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Engeletin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

草魚腎細(xì)胞;GIK順鉑（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cisplatin

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 克拉曲濱,克拉利賓質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,USP34,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Cladribine

CL-0262BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2西地尼布馬來酸鹽質(zhì)量規(guī)格：純度> 99%Cediranib Maleate

HCC細(xì)胞，子宮高分化鱗癌細(xì)胞 人T細(xì)胞Jurkat亞系,Jurkat77細(xì)胞 人癌細(xì)胞;MDA-MB-157西他列汀質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRSitagliptin

786-O(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2維達(dá)列汀;維格列汀質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRVildagliptin

U-2 OS, 人細(xì)胞羥基伊曲康唑-d8質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Hydroxy Itraconazole-d8

人細(xì)胞;HOS 大鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL丁基伊曲康唑質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Butyl Itraconazole

原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml丙基伊曲康唑質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Propyl Itraconazole

EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異丙基伊曲康唑質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Isopropyl Itraconazole

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21噴托維林質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Carbetapentane

大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Ovarian PrimaCell: Normal Ovarian Epithelial CellsRAW 264.7細(xì)胞，小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3熒光素100克

CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)5-氧基-2-巰基本并咪坐 99% 5-Mqthoxy-2-mqrccptobqnzimidczolq 3702-78-1

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) RIBOREADY100BRNALADDERRNA laddeTFrozen

人低分化;GLC-82 [GLC82]免疫血清兔抗HRPshēng huà shì jì容量：100克

人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 )PseudomonasIsolationAgar 500g原裝 BD 292710

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。