冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠心肌成纖維細(xì)胞試劑盒 Rat Cardiac Fibroblast Cell Kit冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠心肌成纖維細(xì)胞試劑盒 Rat Cardiac Fibroblast Cell Kit說明書！

大鼠心肌成纖維細(xì)胞試劑盒 Rat Cardiac Fibroblast Cell Kit

     心?。?/span>cardiac muscle） 由心肌細(xì)胞構(gòu)成的一種肌肉組織。廣義的心肌細(xì)胞包括組成竇房結(jié)、房?jī)?nèi)束、房室交界部、房室束（即希斯束）和浦肯野纖維等的特殊分化了的心肌細(xì)胞，以及一般的心房肌和心室肌工作細(xì)胞。其中，心肌成纖維細(xì)胞約占正常心肌組織細(xì)胞總數(shù)的60%-70%，是中非心肌細(xì)胞的主要組成部分，廣泛存在于組織中，包繞心肌細(xì)胞，連接心肌細(xì)胞間質(zhì)，與、、肥大、梗死等病理狀態(tài)密切相關(guān)。大鼠心肌成纖維細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。 雖然心肌組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的心肌組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的心肌組織片能使得心肌組織中成纖維細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將心肌成纖維細(xì)胞分離開來。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠心肌成纖維細(xì)胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。 大鼠心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的心肌成纖維細(xì)胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠心肌成纖維細(xì)胞組織解離液(3×1ml) （2）大鼠心肌成纖維細(xì)胞組織處理緩沖液(100ml) （3）大鼠心肌成纖維組織洗液(5 x 100 ml) （4）大鼠心肌成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（1ml500x）及血清（5x10ml） （5）大鼠心肌成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 100ml) （6）大鼠心肌成纖維組織預(yù)備液 (1 x 100 ml) （7）大鼠心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠心肌成纖維細(xì)胞試劑盒 Rat Cardiac Fibroblast Cell Kit對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

大鼠*外分泌腺細(xì)胞;AR42J活性炭(凈水、氣體純化專用,棒,φ4.0mm)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格：凈水、氣體純化專用,棒,φ4.0mm

雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL活性炭(藥物脫色,200目)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格：藥物脫色,200目

HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞系 Human活性炭(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí))Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格：細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

TNFRSF11B Others Human 人 TNFRSF11B / OCIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 活性炭(植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí))Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格：植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C10X分子篩(干燥劑用) 質(zhì)量規(guī)格：干燥劑用

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0903 新生兒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLC12E10，10%溶液質(zhì)量規(guī)格：BRC12E10

成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acfC12E9, 10%溶液質(zhì)量規(guī)格：BRC12E9

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征冠狀病毒 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMagenta-Gal

雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7檸檬酸鎂九水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMagnesium citrate nonahydrate

大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1) 細(xì)胞，SHG-44細(xì)胞 W6/32細(xì)胞，小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞十二烷基硫酸鎂(分子生物學(xué))質(zhì)量規(guī)格：>85%,分子生物學(xué)級(jí)Magnesium dodecyl sulfate

VERO C1008 (E6)非洲綠猴腎細(xì)胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBSβ-D-半乳糖五乙酸酯(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRPentaacetyl-β-D-galactopyranose

IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標(biāo)簽)人造沸石質(zhì)量規(guī)格：Tech GradePermutit

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中國(guó)倉鼠肺細(xì)胞)酚肽二磷酸四鈉(>96%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>96%,BCPhenolphthalein diphosphate tetrasodium salt

原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml吩噻嗪(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPhenothiazine

BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 秦皮甲素質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BREsculin

大鼠心肌成纖維細(xì)胞試劑盒 Rat Cardiac Fibroblast Cell KitHUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞系Bathopxenanthroline4,7-二本基鄰咯啉100毫克CP，97%

人Burkkit細(xì)胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL本醇 BqNZYL cLCOHOL 100-21-6

MMQ 小鼠細(xì)胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-100 Superfine 9050-94-6 100G 分離試劑

FETUB Others Human 人 Fetuin-B / FETUB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) AcidicProtease酸性蛋白酶100克生物技術(shù)級(jí)，1u/mg

人非小細(xì)胞;NCI-H1975(順二酸(馬來酸))

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。