冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Esophagus PrimaCell: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Esophagus PrimaCell: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells說(shuō)明書(shū)！

大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Esophagus PrimaCell: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells

     食管是咽和胃之間的消化管。食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長(zhǎng)和心肺的下降，而逐漸增長(zhǎng)。。其中，食管平滑肌細(xì)胞是食管運(yùn)動(dòng)細(xì)胞，食團(tuán)吞咽后由咽腔進(jìn)入食管上端，食管肌肉即發(fā)生波形蠕動(dòng)，使食團(tuán)沿食管下行至胃。大鼠食管平滑肌細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。 雖然食管平滑肌組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的食管平滑肌組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的食管平滑肌能使得平滑肌組織中平滑肌細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將食管平滑肌細(xì)胞細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠食管平滑肌細(xì)胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以*程度地降低所培養(yǎng)的食管平滑肌原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Esophagus PrimaCell: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱(chēng)凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

PC12細(xì)胞，大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 Hep G2(細(xì)胞) 人低分化;GLC-82 [GLC82]肌苷-5’-磷酸二鈉鹽5-IMP，2Na質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77)尿苷-5’-二磷酸鈉鹽(UDP)Uridine 5'-diphosphate sodium salt from 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

SPC-A-1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5’-尿苷酸二鈉(UMP)5'-UMP-Na2質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

人臍內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHUVEC cDNAdAMP-Na2;脫氧腺苷磷酸二鈉2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Disodium salt(dAMP-Na2)質(zhì)量規(guī)格：>98,BR

小鼠*上皮細(xì)胞(MREpiC)(5×105)ATP.Na2; 腺苷-5’-三磷酸二鈉鹽水合物5'-ATP-Na2質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng),三水合物

成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf-prf米托蒽醌質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BRMitoxantrone

OMG Others Human 人 OMG / OMGP (aa 1-416) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 拉莫三嗪 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRLamotrigine

DQSHS1 迪慶綿羊皮膚成纖維樣細(xì)胞溴酚紅鈉質(zhì)量規(guī)格：>80%,Ind GradeBromophenol red, sodium salt

CM-M062小鼠腎小管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL硬脂酸丁酯(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRButyl stearate

HBE, 正常人上皮細(xì)胞系C10E6，10%溶液質(zhì)量規(guī)格：BRC10E6

FGF2 Protein Human 重組人 bFGF / FGF2 蛋白鏈霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Streptomycin

Dami(人巨核細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞HVMFTenovin-1質(zhì)量規(guī)格：>98%TENOVIN-1

原代上皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml新霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定neomycin

IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 桿菌肽（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Bacitracin

大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL青霉素(>95%(HPLC),BC)質(zhì)量規(guī)格：>95%(HPLC),BCPenitrem A from Penicillium palitans

大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Rat Esophagus PrimaCell: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11 小鼠腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLB9N-二甲基琥珀酰胺酸100克USP級(jí)，98.5%

MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 Mouse錄化芐;芐基錄;錄本 Bqnzyl chloridq;ω-Chlorotoluqnq;1-ChloroMqthylbqnzqnq

NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-25 Coarse 9041-35-4 100G 分離試劑

人非小細(xì)胞;NCI-H2087CG-50離子交換樹(shù)脂，英文名或英文縮寫(xiě)：Amberlite CG-50，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：25克

人表皮淋巴內(nèi)管皮細(xì)胞(HDLEC)(5×105)Maleicaciddiwo7ium 10g/25g/100g原裝 Sigma M9009

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。