冷凍保存細(xì)胞之方法？
小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells說明書！

小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells

     腦是中樞的主要部分，位于顱腔內(nèi)。低等脊椎動(dòng)物的腦較簡(jiǎn)單。人和哺乳動(dòng)物的腦特別發(fā)達(dá)，可分為大腦、小腦和腦干三部分。其中，小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞的主要功能是維持內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡，合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)，維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。 利用本公司試劑盒中提供的腦動(dòng)脈組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的腦動(dòng)脈組織能使得腦微內(nèi)皮細(xì)胞一些功能特性發(fā)生改變，從而將內(nèi)皮細(xì)胞分離開來。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以*程度地降低所培養(yǎng)的腦微內(nèi)皮原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的腦微內(nèi)皮細(xì)胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞組織解離液（3×1ml） （2）小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞組織處理緩沖液（100ml） （3）FibrOutTM小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞成纖維抑制劑（1ml（500X）） （4）小鼠腦微內(nèi)皮組織洗液（5 x 100 ml） （5）小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x 100ml） （7）小鼠腦微內(nèi)皮組織預(yù)備液（1 x 100 ml） （8）小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

Hs 578T(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2甲硝唑雜質(zhì)A（2-甲基-5-硝基咪唑）標(biāo)準(zhǔn)品2-Methyl-5-nitroimidazole質(zhì)量規(guī)格：檢查

Cellgro 25-072-CV Lymphocyte Separation Medium(人淋巴細(xì)胞分離液) 500ml硫酸雙肼屈嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）Dihydralazine sulphate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟裂解物HPA-v L鹽酸阿米替林（標(biāo)準(zhǔn)品）Amitriptyline HCl 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 異丙托溴銨（標(biāo)準(zhǔn)品）IPRATROPIUM BROMIDE質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP賴氨匹林（標(biāo)準(zhǔn)品）DL-Lysine Acetylsalicylate質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定

PGC Others Rat 大鼠 Pepsinogen C / PGC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 苯磺酸鈉(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRSodium benzenesulfonate

B16瘤 過氧化物歧化酶(SOD)質(zhì)量規(guī)格：比活度：>5000 U/mg,BCSuperoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)

A549-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 A549-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells F-12K+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin鹽酸克林霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>800μg/mg,含量測(cè)定Clindamycin HCl

GDNF Protein Rat 重組大鼠 GDNF 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸維拉帕米質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Verapamil HCl

人腎系膜細(xì)胞 (HRMC)(1×106 ) 細(xì)胞名稱 種屬鹽酸維拉帕米（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Verapamil HCl

人Wilms細(xì)胞;G401 大鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL焦地黃苯乙醇甙B1（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Jionoside B1

長尾綠猴腎細(xì)胞;4647N-6022質(zhì)量規(guī)格：>98%,GSNOR抑制劑N6022

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 巴柳氮鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Balsalazide

CL-0217SP2/0(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2依帕司他（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定Epalrestat

LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 小鼠細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素)，GT1.1細(xì)胞 OK(負(fù)鼠(opossum)腎細(xì)胞)三苯甲基坎地沙坦西來替昔酯質(zhì)量規(guī)格：>99%Trityl candesartan cilexetil

小鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial CellsCSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白腦心浸液100毫升

SW620(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-類胱酸 L-Homocystine,≥98% 626-72-2 100MG 通用試劑

人肺泡上皮細(xì)胞HPAEpiC流醋天仙子安 HyoscycMinq Sulfctq 6832-16-1

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Texas/05/2009) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 化高鐵血紅蛋白參比液100g100張RT

KM9304 EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞(彝族)144-48-9化乙酰胺(2-8℃)2-Iodoacetamide

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。