冷凍保存細(xì)胞之方法？
小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse bladder PrimaCell: Normal bladder fibroblasts冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse bladder PrimaCell: Normal bladder fibroblasts說(shuō)明書(shū)！

小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse bladder PrimaCell: Normal bladder fibroblasts

     膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官。在哺乳類(lèi)，它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu)，位于骨盆內(nèi)，其后端開(kāi)口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。其中，大鼠膀胱成纖維細(xì)胞分離自正常大鼠膀胱組織，膀胱成纖維細(xì)胞分泌的生長(zhǎng)因子是一種具有多功能的促有絲分裂原，研究已表明其參與的形成過(guò)程。近年來(lái)，堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在過(guò)程中的作用、與生物學(xué)行為之間的關(guān)系以及上的應(yīng)用已受到重視。小鼠膀胱成纖維細(xì)胞傳10代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。 雖然膀胱成纖維組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的膀胱成纖維組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的膀胱成纖維組織能使得膀胱成纖維細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將膀胱成纖維細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠膀胱成纖維細(xì)胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。 小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的膀胱成纖維細(xì)胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠膀胱成纖維細(xì)胞組織解離液(3×1ml) （2）小鼠膀胱成纖維細(xì)胞組織處理緩沖液 (100ml) （3）小鼠膀胱成纖維組織洗液(5 x 100 ml) （4）小鼠膀胱成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（1ml500x）及血清（5x10ml） （5）小鼠膀胱成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 100ml) （6）小鼠膀胱成纖維組織預(yù)備液 (1 x 100 ml) （7）小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse bladder PrimaCell: Normal bladder fibroblasts對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱(chēng)凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞HVT精噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenoxaprop-P質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

ALCAM Others Rat 大鼠 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-羥基煙酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC))6-Hydroxynicotinic Acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)

大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL正庚醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%（GC))1-Heptanol質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%（GC)

A-375人惡性細(xì)胞 A-375 human maligna melanoma cells DMEM+10% FBS茚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,>99.0%(GC))Indene質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,>99.0%(GC)

BTC Protein Mouse 重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)二十烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Eicosane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

HCT-116細(xì)胞，低分化腺癌細(xì)胞 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,HEC-1-A細(xì)胞 人cDNAHPF cDNA依普利酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Eplerenone

長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647*度酸質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BREtodolac

HAPLN1 Others Human 人 HAPLN1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸伊立替康（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Irinotecan HCl Trihydrate

大鼠細(xì)胞;UMR-106硝酸異康唑質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRIsoconazole Nitrate

DUSP3 Others Human 人 DUSP3 / VHR 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硝酸異康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isoconazole Nitrate

LYVE1 Others Mouse 小鼠 LYVE1 / LYVE-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 舒馬曲坦-d6琥珀酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Sumatriptan-d6 Succinate

大鼠肺大平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL雙氯芬酸甲酯質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Diclofenac Methyl Ester

FRhK-4細(xì)胞，恒河猴胚腎細(xì)胞 EB-3 [EB3](人淋巴樣Butt細(xì)胞) CM-H026人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL雙氯芬酸酰胺質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Diclofenac Amide

BTC Protein Human 重組人 BTC / Betacellulin 蛋白芴甲氧羰基-加巴噴丁質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Fmoc-Gabapentin

MKN45(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 皮下脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)舒巴坦酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Sulbactam Acid

小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse bladder PrimaCell: Normal bladder fibroblasts人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞RNAHHSEC miRNA5 μg植物血球凝集素PHA-P，英文名或英文縮寫(xiě)：PHA-P，級(jí)別：BR,10u/mg，甘薯，液體，規(guī)格：25克

TNFSF15 Others Rat 大鼠 TNFSF15 / TL1A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1，1，3，3-四氧基炳烷 1,1,3,3-Tqtrcmqthoxypropcnq 2010/2/3

人微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL麥芽三塘水合物 95% McLTOTRIOSq HYDRcTq 95 31693-63-3

MLTC-1細(xì)胞，小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 KG-1(細(xì)胞) 人惡性細(xì)胞;A-375 [A375]AZUREA,CHLORIDESALT天青A高純級(jí)25G531-53-3RT

CX3CL1 Protein Human 重組人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)2935-35-5L-(+)-本甘酸L-pxenylglycine

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。