冷凍保存細(xì)胞之方法？
小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Rectal Smooth Muscle Cells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Rectal Smooth Muscle Cells說明書！

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Rectal Smooth Muscle Cells

     是中基本的運(yùn)動(dòng)方式。時(shí)由于平滑肌特殊肌動(dòng)蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動(dòng)蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生，這進(jìn)一步證明了時(shí)的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對(duì)平滑肌細(xì)胞的反應(yīng)。 雖然直腸組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的直腸組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的直腸組織片能使得直腸組織中成直腸細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成直腸細(xì)胞分離開來。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成直腸細(xì)胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以*程度地降低所培養(yǎng)的成直腸原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成直腸組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠直腸平滑肌細(xì)胞組織解離液（3×1ml） （2）小鼠直腸平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液（100ml） （3）FibrOutTM小鼠直腸平滑肌細(xì)胞成纖維抑制劑（1ml（500x）） （4）小鼠直腸平滑肌組織洗液（5x100 ml） （5）小鼠直腸平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子（1ml 500x）及血清（5x10ml） （6）小鼠直腸平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x100ml） （7）小鼠直腸平滑肌組織預(yù)備液（1 x100 ml） （8）小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Rectal Smooth Muscle Cells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Rattus卡洛芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Carprofen質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 長(zhǎng)春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Catharanthine質(zhì)量規(guī)格：>98%，分析標(biāo)準(zhǔn)品

人少突膠質(zhì)細(xì)胞阿苯達(dá)唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Albendazole質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿苯達(dá)唑Albendazole質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟RNAHPA-v miRNA5 μg西立伐他汀鈉Cerivastatin sodium 質(zhì)量規(guī)格：BR

CD1E & B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氯化鈣二水質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRCalcium chloride, dihydrate

EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8乙二醇質(zhì)量規(guī)格：BREthylene glycol

大鼠細(xì)胞;RH-35 細(xì)胞，QGY-7701細(xì)胞 NIT-1細(xì)胞，小鼠瘤β細(xì)胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠SV40巨T抗原)乙硫異煙胺,硫異煙胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ethionamide

CaEs-17, 人細(xì)胞株 Human依曲韋林質(zhì)量規(guī)格：>98%Etravirine

EML2 Others Human 人 EML2 / TLT2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 法莫替丁質(zhì)量規(guī)格：>98%Famotidine

MDBK(牛腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphB2 / Hek5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 四(乙硫基)四硫富瓦烯[有機(jī)電子材料]質(zhì)量規(guī)格：Tetrakis(ethylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆); EPO-CHO-T雙(二硫代苯偶酰)鎳(II)(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)Bis(dithiobenzil)nickel(II)

LYZL2 Others Human 人 Lysozyme 2 / LYZL2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雙(四丁銨)合雙(順丁烯腈二硫醇)鎳(II)(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Bis(tetrabutylammonium) Bis(maleonitriledithiolato)nickel(II) Complex

淋巴內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)四丁銨雙(馬來腈基二硫醇)鎳(Ⅲ)絡(luò)合物(>90.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(T)Tetrabutylammonium Bis(maleonitriledithiolato)nickel(III) Complex

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 人肺，NCI-H2170[H2170]細(xì)胞 L6565(小鼠L6565克隆細(xì)胞系)順式-孟魯司特質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口cis-Montelukast

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Rectal Smooth Muscle Cells正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52ED-泛醇5克2～8℃

CD70 Others Human 人 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乙酸鹽酸鹽 3-Pyridylacetic acid hydrochloride,98% 6419-36-9 1G 通用試劑

人肝永生化細(xì)胞;THLE-3L-精安醋言醋鹽;L-言醋蛋柏安基醋;L-言醋胍基務(wù)安醋;言醋L-精安醋 L-crgininq xy7nochloridq;L-GucnidinqcMinovclqric ccid xy7nochloridq 1119-34-

大鼠腦膜細(xì)胞(RMC)(5×105)鄰本二酚紫50毫克保存：-20℃

CM-H048人胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL7681-52-9安替福民 ;次錄酸鈉wo7ium hypochlorite

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。