冷凍保存細(xì)胞之方法？
小鼠平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells說(shuō)明書(shū)！

小鼠平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells

     小鼠平滑肌細(xì)胞分離自正常小鼠平滑肌，呈長(zhǎng)紡錘形纖維狀分布。該細(xì)胞在維持氣道張力維持形態(tài)中起重要作用，氣道平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和的基礎(chǔ)。 雖然組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的組織片能使得組織中成細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成細(xì)胞。本體系提供了*的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以*程度地降低所培養(yǎng)的成原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠平滑肌細(xì)胞組織解離液（3×1ml） （2）小鼠平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液（100ml） （3）FibrOutTM小鼠平滑肌細(xì)胞成纖維抑制劑（1ml（500x）） （4）小鼠平滑肌組織洗液（5x100 ml） （5）小鼠平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子（1ml 500x）及血清（5x10ml） （6）小鼠平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5x100 ml） （7）小鼠平滑肌組織預(yù)備液（1 x100 ml） （8）小鼠平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱(chēng)凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 卡馬西平Carbamazepine質(zhì)量規(guī)格：>99,BR

人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251卡馬西平（標(biāo)準(zhǔn)品）Carbamazepine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

20. 細(xì)胞系統(tǒng)卡鉑Carboplatin質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

CM-H128人角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL卡鉑（標(biāo)準(zhǔn)品）Carboplatin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠子細(xì)胞;U14 小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸長(zhǎng)春新堿/硫酸醛基長(zhǎng)春堿Vincristine Sulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)3,4-苯并芘(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品3,4-Benzopyrene

LNCaP clone FGC細(xì)胞，細(xì)胞 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,AN3 CA細(xì)胞 人平滑肌細(xì)胞cDNAHPSMC cDNA1,3-丁二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 (±)-1,3-Butanediol

EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8乙酸銨(分子生物學(xué)級(jí))質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)Ammonium acetate

GZMB Others Human 人 Granzyme B / GZMB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 微晶纖維素(100 um)質(zhì)量規(guī)格：BR,100 umCellulose, Microcrystalline

大鼠腦膜細(xì)胞RMC乳糖；α-乳糖,一水質(zhì)量規(guī)格：BRalpha-Lactose, monohydrate

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36磺基水楊酸鈉質(zhì)量規(guī)格：ARSodium sulfosalicylate

RTN4R Others Human 人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 亞硝基紅鹽質(zhì)量規(guī)格：ARNitroso R Salt

人*上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL玫瑰紅酸鈉質(zhì)量規(guī)格：ARRhodizonic acid sodium salt

HT1080細(xì)胞，人成纖維細(xì)胞 熱帶念珠菌 tTA基因修飾的小鼠(B類(lèi));F9-CAG-tTA-1A3靛藍(lán)二磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：ARIndigo carmine

CCL3 Protein Rat 重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白四(戊硫代)四硫富瓦烯[有機(jī)電子材料]質(zhì)量規(guī)格：Tetrakis(pentylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]

小鼠平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 Mouse AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle CellsTNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-二乙基亞硝，英文名或英文縮寫(xiě)：N-nitnosodietxylamine，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：5克

人*間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-hp2-羰基鈉鹽 Sodium 2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用試劑

TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L(+)樹(shù)膠全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0

VERO細(xì)胞衍生株;SVP偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V50shēng huà shì jì容量：2～8℃1克

CGM1細(xì)胞，EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL470-82-61,8-桉樹(shù)腦Cineole

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。