冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠胎兒表皮組織提取物 Embryo: Normal Rat Fetal Epidermal Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠胎兒表皮組織提取物 Embryo: Normal Rat Fetal Epidermal Derivatives說明書！

大鼠胎兒表皮組織提取物 Embryo: Normal Rat Fetal Epidermal Derivatives

     表皮組織是由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠胎兒表皮組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠胎兒表皮組織提取物 Embryo: Normal Rat Fetal Epidermal Derivatives對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823硫代硫酸鉀(>98%,BR)Potassium thiosulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 草酸鈦鉀二水(>98%,BC)Potassium titanyl oxalate ,dehydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC

CM-H130人視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL對苯二甲醛(>98%,BR)p-Phthaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

MKN-28細(xì)胞，人細(xì)胞 人細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 幼蚊細(xì)胞;C6/36丙基紅(>80%,Ind Grade)Propyl red質(zhì)量規(guī)格：>80%,Ind Grade

DLD-1(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2吡唑(>98%，BR)Pyrazole質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 大鼠肝細(xì)胞瘤，H-4-II-E細(xì)胞 RAW 264.7(單核巨噬細(xì)胞)環(huán)孢素D Cyclosporin D質(zhì)量規(guī)格：>95%

人*導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1帕比司他Panobinostat (LBH589, NVP-LBH589)質(zhì)量規(guī)格：>98%,廣譜HDAC抑制劑

GPC3 Others Human 人 Glypican-3 / GPC3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二（芐氧基甲基)-5-氟尿嘧啶1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO5-氟乳清酸水合物5-Fluoroorotic acid hydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶5-Fluoro-1,3-dimethyluracil質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 普瑞巴林（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定Pregabalin

豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1(S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林雜質(zhì)）（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用[(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity）

LTEP-a-2細(xì)胞，人 猴腎細(xì)胞系,VERO E6細(xì)胞 CM-M050小鼠卵巢顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL山梨醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用D-Sorbitol

SHG-44 (人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用Ethylene Glycol

NHEK.f-c pooled 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)少年，混合 500,000cells 原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml香荊芥酚（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供含量測定用5-Isopropyl-2-methylphenol

大鼠胎兒表皮組織提取物 Embryo: Normal Rat Fetal Epidermal Derivatives人平滑肌細(xì)胞裂解物HCSMCL肌酸，英文名或英文縮寫：Creatine Monohydrate，級別：BR，99%，規(guī)格：25克

AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1.2- 1,2-BUTcNqDIOL 284-03-

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino三氧化鉬 Molybdqnum trioxidq 1313-7-2

tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL5-嶙酸吡哆醛，英文名或英文縮寫：PLP，級別：IND，規(guī)格：5克

A549, 人細(xì)胞系 HumanEC肉湯EC BROTH FOR MICROBIOLOGY

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。