冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物 Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物 Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts Derivatives說明書！

大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物 Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts Derivatives

     大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物是從大鼠原代胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取的，大鼠原代胎兒真皮成纖維細(xì)胞從正常大鼠胚胎組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物 Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

HCMEC-c 人類微內(nèi)皮細(xì)胞(HCMEC) 500,000cells 腦平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)氫化可的松（標(biāo)準(zhǔn)品）Hydrocortisone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)富馬酸伊布利特Ibutilide fumarate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

SORCS1 Others Human 人 SORCS1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 富馬酸伊布利特(標(biāo)準(zhǔn)品)Ibutilide fumarate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Oregon vole 俄勒岡地鼠硫酸異帕米星Isepamicine Sulphate質(zhì)量規(guī)格：含量≥670μg/mg

豬腎細(xì)胞;PK(15)蓓薩羅丁;貝沙羅汀Bexarotene質(zhì)量規(guī)格：>99%

人胎盤絨膜癌細(xì)胞;BeWo氫氯噻嗪雜質(zhì)CHydrochlorothiazide Impurity C質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

HCC-9724細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞,P815細(xì)胞 牛腎細(xì)胞;MDBK氫化可的松-d6Prednisolone-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

MDCK(犬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×29-甲基-d3-腺嘌呤9-Methyl-d3 Adenine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

Promocell C-23010 Fibroblast Growth Medium , 成纖維細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500mlβ-煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸, 縮減環(huán)已基銨鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

牦牛皮膚細(xì)胞;BMU-S1β-煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸,縮減二鉀鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced dipotassium salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CDK2 Others Human 人 CDK2 / p33 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) BOC-L-谷氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRBoc-L-Glutamic acid

人小氣道上皮細(xì)胞cDNAHSAEpiC cDNABOC-L-亮氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRBoc-Leu-OH

CBRH-7919細(xì)胞，大鼠細(xì)胞 人胚突變癌細(xì)胞,Z-HL16C細(xì)胞 組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1mlN-叔丁氧羰基-L-甲硫氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBOC-L-Methionine

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)BOC-L-絲氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRN-(tert-Butoxycarbonyl)-L-serine

TNFRSF10B Others Human 人 TNFRSF10B / AILR2 / CD262 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) BOC-L-苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRBoc-L-phenylalanine

大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物 Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts DerivativesSGC7901(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) V-P試劑盒(甲、乙液)1米

人胚胎成纖維樣細(xì)胞;HEH2肝素 Heparin lithium 9045-22-1 1G 通用試劑

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 羌基酚藍(lán) xy7noXYNcPHTHOL BLUq 63421-32-4

HCC-9204 脂肪酶測試盒500支/包

293 [HEK-293]人胚腎細(xì)胞 293 human embryonic kidney cell line [HEK-293] DMEM+10% FBS溶液0，05mol/(0.1)NA

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。