冷凍保存細(xì)胞之方法？
人組織源細(xì)胞提取物 Human Cancer: Glioma Tissues Cells Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人組織源細(xì)胞提取物 Human Cancer: Glioma Tissues Cells Derivatives說(shuō)明書(shū)！

人組織源細(xì)胞提取物 Human Cancer: Glioma Tissues Cells Derivatives

     人組織源細(xì)胞提取物是從人原代組織源細(xì)胞提取的，人原代組織源細(xì)胞從人組織制備。人組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人組織源細(xì)胞提取物 Human Cancer: Glioma Tissues Cells Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱(chēng)凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

CM-R098大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL托吡酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Topiramate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

KYSE510細(xì)胞，人細(xì)胞 人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,U87MG細(xì)胞 鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-LuVX-680/MK0457，陶扎色替Tozasertib，VX-680/MK-0457質(zhì)量規(guī)格：>99%,pan-Aurora抑制劑

CHO(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2曲司氯銨Trospium chloride 質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6,BR

CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) AG-014699AG-014699質(zhì)量規(guī)格：>98%

小鼠細(xì)胞;Sp2/0-Ag14卡非佐米Carfilzomib/PR171質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

JEG-3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid質(zhì)量規(guī)格：>95%

人成細(xì)胞;Saos-2p, p’-DDE(標(biāo)準(zhǔn)品)p, p’-DDE質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

PPP3CA Others Human 人 PPP3CA / 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) p, p’-DDE標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)p, p’-DDE solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=3%

CL-0429Romas(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2敵草腈(標(biāo)準(zhǔn)品)Dichlobenil質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

人絨毛膜內(nèi)皮細(xì)胞 人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞，CCC-ESF-1細(xì)胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞)乙二醇苯醚(標(biāo)準(zhǔn)品)Ethylene glycol monophenyl ether質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

MFC-GFP(小鼠前細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記)) 5×106cells/瓶×2噻奈普汀酸;噻奈普汀質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTianeptine

B16(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920噻奈普汀酸;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Tianeptine

CM-H031人食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL醋酸恩夫韋地 質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%Enfuvirtide Acetate

B18R Others Vaccinia Virus 牛痘病毒 B18R / B19R 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-海藻糖無(wú)水質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRD-(+)-Trehalose Anhydrous

細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)二醋酸戈那瑞林(LH-RH)質(zhì)量規(guī)格：>98%,二醋酸鹽Gonadorelin Acetate

人組織源細(xì)胞提取物 Human Cancer: Glioma Tissues Cells Derivatives中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;CHL[Phe2,Orn8]-催產(chǎn)素質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin

BxPC-3細(xì)胞，人原位*腺癌細(xì)胞 人皮膚纖維微細(xì)胞系,Malmc細(xì)胞 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催產(chǎn)素質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin

HT-1080(人纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)

Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g[Trp4]-Kemptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR[Trp4]-Kemptide

人髓核細(xì)胞裂解物HNPCL（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Coumarin

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。