冷凍保存細(xì)胞之方法？
人腦內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial Cells Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人腦內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial Cells Derivatives說明書！

人腦內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial Cells Derivatives

     人腦內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從人原代腦內(nèi)皮細(xì)胞提取的，人原代腦內(nèi)皮細(xì)胞從正常人腦內(nèi)皮組織制備。正常人腦內(nèi)皮組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人腦內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial Cells Derivatives對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鉭試劑N-Benzoyl-N-phenylhydroxylamine質(zhì)量規(guī)格：AR

CM-M013小鼠肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL左西孟旦Levosimendan質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

KYSE 150細(xì)胞，人食管鱗癌 人神經(jīng)細(xì)胞,U251細(xì)胞 兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCFBF鋅試劑Zincon質(zhì)量規(guī)格：AR

CCD-1095Sk(人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鉛試劑Dithizone質(zhì)量規(guī)格：AR

CD34 Others Human 人 CD34 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鎂試劑IMagnesonI質(zhì)量規(guī)格：AR

CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)靈芝酸I(標(biāo)準(zhǔn)品)Ganoderic acid I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TG100-115TG100-115質(zhì)量規(guī)格：>98%,PI3Kγ/δ抑制劑

人低分化;GLC-82 [GLC82]鹽酸地芬尼多（標(biāo)準(zhǔn)品）Difenidol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：供含量測定用

人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 )鹽酸烏拉地爾Urapidil Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CL-0463UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞癌)5×106cells/瓶×2鹽酸烏拉地爾（標(biāo)準(zhǔn)品）Urapidil Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定

Hs 1.Tes細(xì)胞，正常人細(xì)胞 人癌細(xì)胞,Hs-578T細(xì)胞 心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMM氘代鹽酸(10g)質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 35% IN D2ODeuterium Chloride

大額牛皮膚細(xì)胞;BFR-S3氘代鹽酸(50g)質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 20% IN D2O Deuterium Chloride

KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代鹽酸(50g)質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 35% IN D2ODeuterium Chloride

CM-H060人支持細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL磷酸-d3(100g )質(zhì)量規(guī)格：D,99%Phosphoric Acid-D3 (D, 99%)

HA Others H4N4 甲型 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代苯-D6(0.6ml x 10 )質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%+0.05%TMSBenzene-D6

人腦內(nèi)皮細(xì)胞提取物 Human Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial Cells DerivativesREG3B Others Mouse 小鼠 REG3B / Pap1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7-O-（三乙基硅基）-10-去乙酰巴卡丁III質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口7-O-(Triethylsilyl)-10-deacetyl Baccatin III

正常大鼠腎細(xì)胞;NRKΔ6,7-巴卡丁III質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Δ6,7-Baccatin III

Panc 10.05細(xì)胞，人*腺癌細(xì)胞 人舌鱗癌細(xì)胞系,TSCCA細(xì)胞 大鼠腦細(xì)胞;C6R-(+)-巴氯芬鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口R-(+)-Baclofen hydrochloride

JeKo-1(人套細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2倍氯米松質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Beclomethasone

Promocell C-25020 Hepatocyte Maienance Medium, 肝細(xì)胞維持培養(yǎng)液 500ml10-羥基華法林(非對映異構(gòu)體混合物)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口10-Hydroxy Warfarin (Mixture of Diastereomers)

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。