冷凍保存細(xì)胞之方法？
人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物 Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物 Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives說明書！

人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物 Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives

     人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物是從人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取的，人胚胎絨毛膜細(xì)胞從正常人胚胎絨毛膜組織制備。正常人胚胎絨毛膜組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物 Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

TE-10細(xì)胞，人細(xì)胞 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,TG-905細(xì)胞 家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S1試亞鐵靈Ferroin indicator solution質(zhì)量規(guī)格：AR

Calu-1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鈣紅,乙二醛縮雙（鄰氨基酚）Glyoxal-bis(2-hydroxyanil)質(zhì)量規(guī)格：AR；98%

PTPRC Others Human 人 CD45 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 羥基萘酚藍(lán)Hydroxynaphthol blue質(zhì)量規(guī)格：金屬滴定指示劑

小鼠前細(xì)胞;MFC硼試劑1-Hydroxy-4-p-toluidinoanthraquinone質(zhì)量規(guī)格：AR

人海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-h)(1×106)石蕊Litmus質(zhì)量規(guī)格：AR

人肺間充質(zhì)干細(xì)胞HPMSC吡嗪酰胺Pyrazinamide質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP

REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿魏酸,松柏酸,反式阿魏酸Ferulic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,合成

大鼠食管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿魏酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Ferulic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

A7r5 大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 A7r5 rat thoracic aortic smooth muscle cells 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS安石榴苷Punicalagin (40%)質(zhì)量規(guī)格：40%,BR

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標(biāo)簽)安石榴甙（標(biāo)準(zhǔn)品）Punicalagin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

MCAM Others Human 人 CD146 / MCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二噻農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Dithianon

CM-H124人腦微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL棉隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%Dazomet

LILRB3 Others Mouse 小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二乙二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Diethylene glycol

小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL二乙二醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)Diethylene glycol

C6-RFP(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦細(xì)胞 C6-RFP (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS十二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)1-Dodecanol

人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物 Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell DerivativesMFC細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 BHK(幼倉鼠腎細(xì)胞) 獼猴肺細(xì)胞;MML2N2-異丁?；B苷一水合物質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRibu-rG

XCL1 Protein Mouse 重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)N4-苯甲酰胞苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBz-rC

RBE(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N6-苯甲?；佘召|(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBz-rA

人小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H209N-乙酰-2'-脫氧-胞苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAc-dC

PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-疊氮-1-三甲基乙酰-D-赤-鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口2-Azido-1-pivaloyl-D-erythro-Sphingosine

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。