冷凍保存細(xì)胞之方法？
人胃粘膜上皮細(xì)胞提取物 Human Gastric: Normal Gastric Epithelial Cell Derivatives冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人胃粘膜上皮細(xì)胞提取物 Human Gastric: Normal Gastric Epithelial Cell Derivatives說明書！

人胃粘膜上皮細(xì)胞提取物 Human Gastric: Normal Gastric Epithelial Cell Derivatives

     人胃粘膜上皮細(xì)胞提取物是從人原代胃粘膜上皮細(xì)胞提取的，人原代胃粘膜上皮細(xì)胞從正常人胃粘膜組織制備。正常人胃粘膜組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人胃粘膜上皮細(xì)胞提取物 Human Gastric: Normal Gastric Epithelial Cell Derivatives對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

TNFRSF9 Others Canine 狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維生素B2（標(biāo)準(zhǔn)品）vitamin B2質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品

CM-M005小鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL核黃素,維生素B2vitamin B2質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

KYSE 450細(xì)胞，人食管鱗癌 神經(jīng)細(xì)胞,CRT細(xì)胞 家兔腎細(xì)胞;RABK3維生素D2（標(biāo)準(zhǔn)品）vitamin D2質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品

CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2磺胺異噁唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfisoxazole質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 膠蒼術(shù)甙，羧基蒼術(shù)苷二鉀鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Carboxyatractyloside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化)2,4-二乙基硫雜蒽-9-酮(>90.0%(GC))2,4-Diethylthioxanthen-9-one質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC)

人癌細(xì)胞;MDA-MB-231 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL安乃近(標(biāo)準(zhǔn)品）Analgin質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人肺泡上皮細(xì)胞cDNAHPAEpiC cDNA艾格列凈;依帕列凈;恩格列嗪Empagliflozin; BI-10773質(zhì)量規(guī)格：>99%,SGLT-2抑制劑

SELP Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BQ123BQ-123質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D3泛影酸（標(biāo)準(zhǔn)品）diatrizoic acid質(zhì)量規(guī)格：鑒別

Ishikawa人細(xì)胞 Human endomeial carcinoma cells Ishikawa RPMI-1640+10%FBS氟胞嘧啶/5-氟胞嘧啶質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Flucytosine

IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白氟胞嘧啶/5-氟胞嘧啶（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Flucytosine

U14(小鼠子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HPAC(人*癌細(xì)胞)非對稱二甲基精氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,鹽酸鹽形式，美國進(jìn)口ADMA

CM-M004小鼠氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN'-硝基-D-精氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98N'-Nitro-D-arginine

TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-天冬酰胺，一水質(zhì)量規(guī)格：0.99D-Asparagine monohydrate

人胃粘膜上皮細(xì)胞提取物 Human Gastric: Normal Gastric Epithelial Cell DerivativesLAMP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-羥環(huán)己基苯酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone

豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1二苯基碘鎓六氟磷酸鹽(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Diphenyliodonium Hexafluorophosphate

AsPc-1細(xì)胞，人轉(zhuǎn)移*癌細(xì)胞 人正常皮膚細(xì)胞,HaCaT細(xì)胞 小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/92-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine

HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2三苯基溴化锍(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Triphenylsulfonium Bromide

Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g2-溴咪唑并[1,2-a]吡嗪質(zhì)量規(guī)格：>98%6-Bromoimidazo[1,2-a]pyrazine

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。