冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠皮下脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalSubcutaneousFatCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠皮下脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalSubcutaneousFatCells說明書！

大鼠皮下脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalSubcutaneousFatCells

     產(chǎn)品描述：大鼠皮下脂肪細(xì)胞主要存在于結(jié)締組織中，能夠合成和貯存脂肪。成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形，胞漿內(nèi)富含脂滴。脂肪細(xì)胞在脂類代謝，能量平衡以及抵等方面起重要作用，與，、、乳癌等多種生理疾病密切相關(guān)。公司提供的大鼠皮下脂肪細(xì)胞，采用組織塊培養(yǎng)法制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatFatPrimaCell:NormalSubcutaneousFatCellsCatNo.3-7554)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠皮下脂肪細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠皮下脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalSubcutaneousFatCells對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

CL-0171NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2溴化新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品)Neostigmine bromide質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人癌細(xì)胞;MDA-MB-468 大鼠小腦顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL木蘭脂素Magnolin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Pcc4 小鼠消旋山莨菪堿Racanisodamine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

SIRPG Others Human 人 SIRPG / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 磺胺間二甲氧嘧啶鈉Sulfadimethoxine sodium salt質(zhì)量規(guī)格：>98%

新生兒細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)磺胺間二甲氧嘧啶鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfadimethoxine sodium salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Promocell C-28015 Mesenchymal Stem CellNeurogenic Differe. Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)性分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml吡羅昔康(標(biāo)準(zhǔn)品)Piroxicam質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人內(nèi)皮細(xì)胞HCAEC泊沙康唑Posaconazole質(zhì)量規(guī)格：>99%

SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 泊沙康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Posaconazole質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1利福昔明Rifaximin質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

大鼠細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3 ，SPC-A-1細(xì)胞 B/c-ES細(xì)胞，BALB/c小鼠ES細(xì)胞利福昔明(標(biāo)準(zhǔn)品)Rifaximin質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE甘膽酸鈉 ;甘氨膽酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%Sodium Glycocholate Hydrate

MERTK Others Human 人 Mer / MERTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甘露醇；D-甘露糖醇質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRMannitol；D-Mannitol

CM-R012大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL氟伐他汀鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRFluvastatin sodium salt

SIRPA Others Mouse 小鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 克林沙星質(zhì)量規(guī)格：>98.5%Clinafloxacin

小鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸左旋咪唑質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRLevamisole HCl

大鼠皮下脂肪細(xì)胞 RatFat:NormalSubcutaneousFatCells人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]5-FAM ；5-羧基熒光素質(zhì)量規(guī)格：>95%5-Carboxyfluorescein

HepG2/2-15細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞,RAW 264.7細(xì)胞 大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3黑色素(水溶)質(zhì)量規(guī)格：BSNigrosine water soluble

MCF-7(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2黑色素(醇溶）質(zhì)量規(guī)格：BSNigrosin alcohol soluble

Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml7-羥基;傘形花內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品7-Hydroxycoumarin

人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒HDF-f6,7,8,9脫氫帕潘立酮鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口6,7,8,9 Dehydro Paliperidone Hydrochloride

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。