冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCells說(shuō)明書！

大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCells

     產(chǎn)品描述：視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜之間的離子、水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與視黃醇循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性，并分泌多種生長(zhǎng)因子，幫助維持脈絡(luò)膜內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。公司提供的大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，采用胰酶消化制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatEyePrimaCell:NormalRetinalPigmentEpithelialCellsCatNo.3-7533)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

ANGPT2 Others Human 人 ANG2 / Angiopoietin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 溴鄰苯三酚紅Bromopyrogallol red質(zhì)量規(guī)格：IND

星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基ACM鹽酸副品紅Basic Fuchsin質(zhì)量規(guī)格：BS,用于生物學(xué)染色

CD164 Others Human 人 CD164 / Endolyn 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 燦爛黃Brilliant Yellow質(zhì)量規(guī)格：IND

GPS5 豚鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞剛果紅(AR)Congo red質(zhì)量規(guī)格：AR

CM-R123大鼠角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鈣羧酸指示劑(AR)Calconcarboxylic acid質(zhì)量規(guī)格：AR

兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1吡嗪(>98.0%(GC))Pyrazine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

小鼠細(xì)胞;B16-F1 小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2,3-吡嗪二羧酸(>98.0%(HPLC)(T))2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系 Rattus茴香偶酰(>98.0%(GC))p-Anisil質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 苯偶酰(>99.0%(GC))Benzil質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)

人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞HN-h苯偶酰 (區(qū)域精制法精制,熔段數(shù):22)Benzil Zone Refined (number of passes:22)質(zhì)量規(guī)格：

DPEP1 Others Human 人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 糠酸莫米松(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Mometasone furoate

人結(jié)膜成纖維細(xì)胞HConF納他霉素,匹馬霉素,那他霉素,游霉素質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRNatamycin,Pimaricin

ALVA細(xì)胞，人細(xì)胞 大鼠氣管上皮細(xì)胞,RTE細(xì)胞 大鼠腦膜細(xì)胞RMC硫酸銅五水(AR)質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%Copper(II) sulfate, pentahydrate

J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-乙酰-D-氨基葡萄糖質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Acetyl-D-glucosamine

A-375(人惡性細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H123人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17硫酸錳一水(AR)質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%Manganous sulfate monohydrate

大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCellsVCaP(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7苯丙氨酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Phenprobamate

人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒裂解物HDF-f L哈西奈德（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Halcinonide

PRNP Others Human 人 PRNP / Prion 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氯化膽堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：TLC法檢查Choline chloride

人急性T淋巴細(xì)胞性細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572)靈芝酸G(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ganoderic acid G

tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-3C8 透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL6α-甲基氫化可的松21-醋酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6α-Methylprednisolone 21-Acetate

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。