冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞 RatEye：NormalTrabecularMeshworkCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞 RatEye：NormalTrabecularMeshworkCells說明書！

大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞 RatEye：NormalTrabecularMeshworkCells

     產(chǎn)品描述：小梁網(wǎng)細(xì)胞在房水流動機制中發(fā)揮重要作用。在小梁網(wǎng)細(xì)胞中有特定的神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)肽受體，其中包括腎上腺素，乙酰膽堿和神經(jīng)肽Y。在小梁細(xì)胞中，一長串的活性多肽和生長因子能夠觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)機制。小梁網(wǎng)細(xì)胞可合成不同類型的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白以及金屬蛋白酶。公司提供的大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞，采用胰酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatEyePrimaCell：NormalTrabecularMeshworkCellsCatNo.3-7526)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞 RatEye：NormalTrabecularMeshworkCells對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM溴氯酚藍(lán)[pH指示劑]Bromochlorophenol Blue質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑

APCDD1 Others Human 人 APCDD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙基橙[pH指示劑]Ethyl Orange質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑

人B淋巴母細(xì)胞;HMy2.CIR4-乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))4-Ethoxychrysoidine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)

正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽性);NRK49F 轉(zhuǎn)移*腺癌細(xì)胞，AsPC-1細(xì)胞 McCoy細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞系DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]質(zhì)量規(guī)格：用于蛋白質(zhì)組分析，用于高效液相色譜標(biāo)記，熒光染料，用于質(zhì)譜的衍生化試劑

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 Human2,3-萘二醛(>99.0%(GC))2,3-Naphthalenedialdehyde質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)

Hep3B2.1-7細(xì)胞，人細(xì)胞 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞,D341Med細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24吡嗪酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Pyrazinamide質(zhì)量規(guī)格：含量測定

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2鹽酸地美環(huán)素；去甲基金霉素Demeclocycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>900μg/mg,BR

Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化培養(yǎng)基無誘導(dǎo)劑(即用型) 100ml鹽酸地美環(huán)素；去甲基金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Demeclocycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：效價測定,標(biāo)準(zhǔn)品

人海馬趾神經(jīng)元RNAHN-h miRNA5 μg甲基帕羅西汀N-Methyl Paroxetine質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠神經(jīng)黑質(zhì)細(xì)胞(MN-sn)(1×106)硫酸頭孢喹諾Cefquinome sulfate質(zhì)量規(guī)格：干品Cefquinome>80%,BR

小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL水合紅菲繞啉二磺酸鈉水合物質(zhì)量規(guī)格：用于亞鐵離子的測定Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate

THP1-Blue (穩(wěn)定株)人單核細(xì)胞 THP1-Blue (stable sain) in human monocytes 1640+10% FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+0.05mM β-ME浴銅靈 (升華提純)(>99.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T)Bathocuproine (purified by sublimation)

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白莫吉司坦質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMoguisteine

人脈絡(luò)絲成纖維細(xì)胞 (HCPF)( 5×105 ) HUVEC, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞 Caco-2，人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞莫吉司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Moguisteine

CM-R017大鼠*導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL糠酸莫米松質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP31Mometasone furoate

大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞 RatEye：NormalTrabecularMeshworkCells人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒總RNAHDF-f NA絞股藍(lán)皂苷XLIX(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Gypenoside XLIX

KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) YM-201636質(zhì)量規(guī)格：>98%,PIKfyve抑制劑YM201636

人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL金石蠶苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Poliumoside

VERO E6細(xì)胞，猴腎細(xì)胞系 Lec1(卵巢細(xì)胞) 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]金絲桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Hyperoside

EFNA5 Protein Canine 重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)6-甲氧基-2-萘乙酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：TLC法檢查2-Acetyl-6-methoxynaphthalene

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。