冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠小腦顆粒細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebellarGranuleCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠小腦顆粒細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebellarGranuleCells說明書！

大鼠小腦顆粒細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebellarGranuleCells

     產(chǎn)品描述：小腦顆粒細(xì)胞是腦中數(shù)量最多的神經(jīng)元，在人腦中大約為1010億個(gè)。小腦顆粒細(xì)胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維，正是這種排列保證了興奮的單向傳導(dǎo)，這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設(shè)。小腦顆粒細(xì)胞通過g-氨基丁酸接受戈?duì)柤?xì)胞的抑制性突觸的信息傳入。公司提供的大鼠小腦顆粒細(xì)胞，采用胰酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠小腦顆粒細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatBrainPrimaCell:NormalCerebellarGranuleCellsCatNo.3-7442)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠小腦顆粒細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠小腦顆粒細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebellarGranuleCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21巖大戟內(nèi)酯B（標(biāo)準(zhǔn)品）Jolkinolide B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人肝細(xì)胞 (HH) (1×106 )路路通內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Liquidambaric lactone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0051CaES-17(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2甘油三油酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Glycerine trioleate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12 小鼠肺平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL長(zhǎng)春花堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Vinblastine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HCT/Taxol 人紫杉醇耐藥長(zhǎng)春花堿Vinblastine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR

RLE-6TN細(xì)胞，大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞 PC-3(人細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Allocryptopine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)LGD-4033 LGD4033 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

16HBE(人上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH35-溴嘧啶5-Bromopyrimidine 質(zhì)量規(guī)格：>98%

人上皮細(xì)胞;Hep-2阿螺旋霉素17-DMAG質(zhì)量規(guī)格：HSP90 抑制劑，進(jìn)分

LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大豆異黃酮Soybean isoflavones質(zhì)量規(guī)格：染料木素17%-20%,異黃酮含量在40-50%

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞HUMSC辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4% Phoxim solution

猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A 細(xì)胞，SHG44細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞)辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%Phoxim solution

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1002甲基橙(IND)質(zhì)量規(guī)格：INDMethyl orange

NOG Others Human 人 Noggin / NOG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲基紅鈉鹽(IND)質(zhì)量規(guī)格：INDMethyl Red sodium salt

CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甲基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %)質(zhì)量規(guī)格：ACS reagent,95 %Methyl Red sodium salt

大鼠小腦顆粒細(xì)胞 RatBrain:NormalCerebellarGranuleCells人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞RNAHDMEC miRNA5 μgβ-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 3'-磷酸鈉鹽水合物質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口β-Nicotinamide adenine dinucleotide 3'-phosphate sodium salt hydrate

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 腺嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Adenine hydrochloride

家兔腎細(xì)胞;RABK3硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Thionicotinamide adenine dinucleotide

HIC細(xì)胞，人小細(xì)胞系 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成細(xì)胞,U2OS-Luc teT-on細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T](R)-9-[2-(二乙基磷酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口(R)-9-[2-(Diethylphosphonomethoxy)propyl] Adenine

HL-60(人早幼粒急性細(xì)胞) 5×106cells/瓶×27-二去甲基米諾環(huán)素二鹽酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口7-Didemethyl Minocycline Dihydrochloride

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。