冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 RatLymphoid：NormalLymphoidFibroblastCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 RatLymphoid：NormalLymphoidFibroblastCells說明書！

大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 RatLymphoid：NormalLymphoidFibroblastCells

     產(chǎn)品描述：大鼠淋巴成纖維細(xì)胞分離自正常大鼠淋巴節(jié)，成纖維細(xì)胞是胚胎中胚層起源的間葉細(xì)胞。它們被廣泛地用于細(xì)胞和分子方面的研究。這主要是因為纖維原細(xì)胞是體外培養(yǎng)中最容易生長的一類細(xì)胞，它們的耐久力使它們能夠用于基因轉(zhuǎn)染、顯微注射等多種操作。有確鑿的證據(jù)表明，在身體不同的部分的成纖維細(xì)胞有顯著的不同。組織中的成纖維細(xì)胞暴露在動態(tài)的機(jī)械環(huán)境中將影響健康的和正在愈合的軟組織的結(jié)構(gòu)完整性。纖維原細(xì)胞分泌富含I和，或III型膠原的細(xì)胞外基質(zhì)。另外，有報道指出在疾病中*成纖維細(xì)胞大量增長。公司提供的大鼠淋巴成纖維細(xì)胞，采用膠原酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatLymphoidPrimaCell:NormalLymphoidFibroblastCellsCatNo.3-7365)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠淋巴成纖維細(xì)胞傳10代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 RatLymphoid：NormalLymphoidFibroblastCells對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸艾司洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Esmolol HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human鹽酸艾司洛爾Esmolol HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CD9 Others Human 人 CD9 / Tspan-29 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) H-Met-OtBu.HCLH-Met-OtBu·HCl質(zhì)量規(guī)格：0.98

羊源細(xì)胞麥芽糖醇Maltitol 質(zhì)量規(guī)格：>98%

IL1RAPL1 Others Mouse 小鼠 IL-1R8 / IL1RAPL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽L-Threonine methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：0.98

人急性淋巴母細(xì)胞性細(xì)胞;MOLT-4布地奈德（標(biāo)準(zhǔn)品）Budesonide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亞葉酸鈣Calcium Folinate質(zhì)量規(guī)格：>98%，水合物,BR

CM-H110人皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL亞葉酸鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）Calcium Folinate質(zhì)量規(guī)格：>98%,含量測定

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 ,EL4IL-2細(xì)胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤)喜樹堿Camptothecin質(zhì)量規(guī)格：> 99%,喜樹提取

小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11喜樹堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Camptothecin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品

GRN Others Mouse 小鼠 GRN / Granulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 枸櫞酸莫沙比利(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定Mosapride Citrate

CM-R053大鼠卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL枸櫞酸莫沙比利質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%,BR,二水合物Mosapride Citrate

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 青霉素G鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>1500U/mg,USP,BRPenicillin G, sodium salt

大鼠顆粒細(xì)胞RGC青霉素G鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：效價測定Penicillin G, sodium salt

NCI-H1703[H1703]細(xì)胞，人細(xì)胞 人細(xì)胞,5637(HTB-9)細(xì)胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC米格列奈鈣質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRMitiglinide calcium Hydrate

大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 RatLymphoid：NormalLymphoidFibroblastCellsRBE, 人肝細(xì)胞6-去氟-6-羥基利培酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone

HUVEC, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞7-羥基利培酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口7-Hydroxy Risperidone

人B淋巴母細(xì)胞;HMy2.CIR 人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL羥基利托那韋質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Hydroxy Ritonavir

人正常肝細(xì)胞;L-02去噻唑基甲氧基碳酰 利托那韋質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir

DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 9'-去甲格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)C）質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口9'-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity C)

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。