冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠腎上皮細(xì)胞 RatKidney:NormalRenalArteryEndothelialCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠腎上皮細(xì)胞 RatKidney:NormalRenalArteryEndothelialCells說明書！

大鼠腎上皮細(xì)胞 RatKidney:NormalRenalArteryEndothelialCells

     產(chǎn)品描述：大鼠腎上皮細(xì)胞分離自正常大鼠腎組織，腎上皮細(xì)胞主要功能：（1）腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸，并排泌非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿。（2）細(xì)胞能分泌介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子，通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性反應(yīng)。（3）是許多先天性疾病、代謝性疾病和的主要損傷部位。（4）在移植癥和新月體中上皮細(xì)胞表達(dá)IL-2Ralpha和MHC-Ⅱ類抗原，參與腎免疫損傷的發(fā)生。公司提供的大鼠腎上皮細(xì)胞，采用膠原酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatKidneyPrimaCell5:NormalRenalArteryEndothelialCellsCatNo.3-7260)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠腎上皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠腎上皮細(xì)胞 RatKidney:NormalRenalArteryEndothelialCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

幼蚊細(xì)胞;C6/36鹽酸達(dá)克羅寧（標(biāo)準(zhǔn)品）Dyclonine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

NLK Others Human 人 nemo-like kinase / NLK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) SGI-1027SGI1027質(zhì)量規(guī)格：>98%,DNMT抑制劑

CL-0266LS 180(人腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸溴己新（標(biāo)準(zhǔn)品）Bromhexine HCl質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

EPC, 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞 非洲綠猴腎，BS-C-1細(xì)胞 hFOB 1.19(SV40 轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞)雷西莫特R848,Resiquimod質(zhì)量規(guī)格：>98%,TLR7/TLR8激動(dòng)劑

人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A羥甲煙胺（標(biāo)準(zhǔn)品）N-(Hydroxymethyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

HCCC-9810細(xì)胞，膽管細(xì)胞型細(xì)胞 人二倍體細(xì)胞系,HL細(xì)胞 小鼠細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]橙黃ⅠOrangeⅠ質(zhì)量規(guī)格：IND

小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32專利藍(lán)VF Patent Blue VF質(zhì)量規(guī)格：Indicator

RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酚酞(IND)Phenolphthalein質(zhì)量規(guī)格：IND

人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓裂解物HMSC-bm L碘化鉀溶液(100g/L)Potassium iodide solution質(zhì)量規(guī)格：100g/L

GPNMB Others Mouse 小鼠 GPNMB / Osteoactivin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 碘化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N))Potassium iodide solution質(zhì)量規(guī)格：1/60mol/L(0.1N)

小鼠顆粒細(xì)胞MGC超細(xì)高嶺土(1250(11um))質(zhì)量規(guī)格：1250(11um)Kaolin(superfine)

猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4- 慢性髓原，K562細(xì)胞 BxPC-3(原位*腺癌細(xì)胞)超細(xì)高嶺土(3000(5um))質(zhì)量規(guī)格：3000(5um)Kaolin(superfine)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0923磺胺醋酰鈉 SA-NA（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Sufacetamide sodium

CFH Others Human 人 CFH / Compleme Factor H 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 舒必利質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,EP6.0Sulpiride

CM-R077大鼠外膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL他達(dá)那非質(zhì)量規(guī)格：>99%Tadalafil

大鼠腎上皮細(xì)胞 RatKidney:NormalRenalArteryEndothelialCells人脂肪微內(nèi)皮細(xì)胞HAMEC抗壞血酸；維生素C質(zhì)量規(guī)格：AR;>99%Ascorbic acid；vitamin C

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 維生素C(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Ascorbic acid；vitamin C

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺質(zhì)量規(guī)格：AROctadecanamine

NCI-H157細(xì)胞，人非小細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,S-180細(xì)胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL山梨酸質(zhì)量規(guī)格：AR,99%Sorbic acid

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品DL-Menthol

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。