冷凍保存細(xì)胞之方法？
大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCells說(shuō)明書！

大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCells

     產(chǎn)品描述：大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞分離自正常大鼠大隱內(nèi)皮，呈單層扁平分布。內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成的內(nèi)壁，是管腔內(nèi)血液及其他壁（單層）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由直至最少的微。公司提供的大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞，均來(lái)自新鮮組織。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(RatVascularPrimaCell:NormalSaphenousVeinEndothelialCellsCatNo.3-7190)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

HFL-I細(xì)胞，人胚 鼠肌原細(xì)胞,C2C12細(xì)胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL鹽酸氟西汀（標(biāo)準(zhǔn)品）Fluoxetine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2馬來(lái)酸氟伏沙明Fluvoxamine maleate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BP2007

HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)馬來(lái)酸氟伏沙明（標(biāo)準(zhǔn)品）Fluvoxamine maleate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

原代細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml福美斯坦Formestane質(zhì)量規(guī)格：>99%

MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 福美斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Formestane質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

人角膜上皮細(xì)胞裂解物HCEpiCL促腎上腺皮質(zhì)激素（1-10），人ACTH (1-10), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CCL6 Others Mouse 小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素（1-13），人ACTH (1-13), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

BEAS-2B 人上皮細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素（1-16），人ACTH (1-16), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CL-0166NCI-H1650(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素（1-17），人ACTH (1-17), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24), 人ACTH (1-24), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

DMBT1 Others Human 人 DMBT1 / GP340 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 米格列醇質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMiglitol

CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL米格列醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：GC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Miglitol

PLA2G2D Others Human 人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氟化鎳四水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNickel (II) fluoride tetrahydrate

小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓MMSC-bm二氧化硅(>99.9%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99.9%,BRSilicon (IV) oxide

Sol8細(xì)胞，小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞 人腎上皮細(xì)胞,GES細(xì)胞 人骨骼肌成肌細(xì)胞HSkMM氟化鍶(>97%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRStrontium fluoride

大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞 RatVascular:NormalSaphenousVeinEndothelialCellsQSG-7701細(xì)胞，人胚肝細(xì)胞正常 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株,7WPS1細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆); EPO-CHO-T7-酮基去氫表雄酮質(zhì)量規(guī)格：>98%7-Keto-dehydroepiandrosterone

LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硝酸銣質(zhì)量規(guī)格：>99%Rubidium nitrate

Promocell Drosophila Schneider's Drosophila Medium果蠅培養(yǎng)基，無(wú)L-谷氨酰胺 500mlCHIR-99021 (CT99021.HCl)質(zhì)量規(guī)格：>99%,GSK-3α/β抑制劑CHIR-99021 (CT99021) HCl

人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNAHASMC NA駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Harmaline;Dihydroharmine

CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) JNJ-26854165 (Serdemetan)質(zhì)量規(guī)格：>98%JNJ 26854165

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。