冷凍保存細(xì)胞之方法？
小鼠角膜成纖維細(xì)胞 MouseEye:NormalCornealFibroblasts冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠角膜成纖維細(xì)胞 MouseEye:NormalCornealFibroblasts說(shuō)明書(shū)！

小鼠角膜成纖維細(xì)胞 MouseEye:NormalCornealFibroblasts

     產(chǎn)品描述：小鼠角膜成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織中最常見(jiàn)的一種細(xì)胞，其功能是可在角膜后修復(fù)組織。公司提供的小鼠角膜成纖維細(xì)胞，采用胰酶消化制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠角膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseEyePrimaCell：NormalCornealFibroblastsCatNo.3-4505)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠角膜成纖維細(xì)胞傳10代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠角膜成纖維細(xì)胞 MouseEye:NormalCornealFibroblasts對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

腸內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)鹽酸頭孢卡品酯Cefcapene pivoxil HCl質(zhì)量規(guī)格：JP;722~764μg/mg

人少突膠質(zhì)細(xì)胞 人細(xì)胞，SK-MES-1細(xì)胞 P3X63Ag8.653(細(xì)胞)*紅霉素Erythromycin Estolate質(zhì)量規(guī)格：USP,干品含量>600 μg/mg

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2*紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Erythromycin Estolate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

SERPINA11 Others Mouse 小鼠 SERPINA11 / Serpina11 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2，6-二氯靛酚鈉(DCIP)2,6-Dichloroindophenol, sodium salt hydrate(DCIP)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

雜交瘤(B類);C3110D2E11非諾洛芬鈣Fenoprofen Calcium質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

人肝永生化細(xì)胞;THLE-3 人微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL蛋白激酶C（19-36）；蛋白激酶C選擇性抑制蛋白Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

人口腔角質(zhì)細(xì)胞RNAHOK miRNA5 μg蛋白激酶C（530-558）Protein Kinase C (530-558)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白拼接同種型3（104-173），人pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

豬腎細(xì)胞;LLC-PK1甲狀旁腺激素（13-34），人pTH (13-34) (human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

THC-8307細(xì)胞，人高分化腺癌細(xì)胞系 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞,OCM-1A細(xì)胞 綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞;MGC803-GFP甲狀旁腺激素（3-34），牛pTH (3-34) (bovine)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

TNFSF10 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF10 / AIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標(biāo)簽)雙嘧達(dá)莫質(zhì)量規(guī)格：>98%,USPDipyridamole

人肝間充質(zhì)干細(xì)胞(肝)(HMSC-HE)(5×105) HGC-27人細(xì)胞 Human他米巴羅汀質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%Tamibarotene

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9402分子篩3A(干燥劑用)質(zhì)量規(guī)格：干燥劑用Molecular sieves, 3 ?

人齒根膜韌帶成纖維細(xì)胞(HPDLF)( 5×105 )分子篩3A(pellets,3-5 mm)質(zhì)量規(guī)格：pellets,3-5 mmMolecular sieves, 3 ?

CL-0406NCI-H838(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2分子篩3A(pellets,2-3 mm)質(zhì)量規(guī)格：pellets,2-3 mmMolecular sieves, 3 ?

小鼠角膜成纖維細(xì)胞 MouseEye:NormalCornealFibroblastsC57小鼠瘤株;ME (Me)6-O-去甲多奈哌齊質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6-O-Desmethyl Donepezil

WEHI 22.1細(xì)胞，B淋巴細(xì)胞 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞,HIBEpiC細(xì)胞 CL-0096HCT 116(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2脫氫多奈哌齊（多奈哌齊雜質(zhì)）質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Dehydro Donepezil (Donepezil Impurity)

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-多佐胺中間體質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Dorzolamide intermediate

MCPT1 Others Mouse 小鼠 MCPT1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6‘-羥基多沙唑嗪質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6'-Hydroxy Doxazosin

神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)Prosapogenin CP6質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Prosapogenin CP6

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。