冷凍保存細(xì)胞之方法？
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 MouseAlveolar：AlveolarMacrophages冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 MouseAlveolar：AlveolarMacrophages說(shuō)明書(shū)！

小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 MouseAlveolar：AlveolarMacrophages

     產(chǎn)品描述：巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞容易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2－3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長(zhǎng)期生存。公司提供的小鼠腦膜細(xì)胞，采用胰酶消化制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseAlveolarPrimaCell:NormalAlveolarMacrophagesCatNo.3-4435)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠肺泡巨噬細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 MouseAlveolar：AlveolarMacrophages對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12鹽酸左氧氟沙星Levofloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

心房成纖維細(xì)胞 (HCFaa)( 5×105 )鹽酸左氧氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Levofloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CM-M121小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL俾士麥棕,俾士麥棕RBismarck Brown R質(zhì)量規(guī)格：BS

野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d 小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL酒石酸泰樂(lè)菌素,酒石酸泰洛星Tylosin Tartrate質(zhì)量規(guī)格：BR

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse酒石酸泰樂(lè)菌素(標(biāo)準(zhǔn)品)Tylosin Tartrate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

293T/17人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293T/17 DMEM+10%FBS敵草索(標(biāo)準(zhǔn)品) Dacthal質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白1-氯辛烷(標(biāo)準(zhǔn)品)1-Chlorooctane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

BEL-7405(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人真皮成纖維母細(xì)胞-新生HDF-n十二烷(標(biāo)準(zhǔn)品)Dodecane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC)

人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHLEC cDNA鉍標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體: 5％HNO3)Bismuth solution質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體: 5％HNO3

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)Copper solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3

CL-0397NCI-H23(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2藍(lán)銅肽/甘氨酰-L-組氨酰-L-賴氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98.5%GHKcu/Growth-modulating peptide

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Sars蛋白表達(dá)株，293001B細(xì)胞 NCI-H520 [H520](人細(xì)胞)氨苯蝶啶 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTriamterene

人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M IE8卡拉膠質(zhì)量規(guī)格：粘度≥0.005 pa.sCarrageenan

BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 普侖司特質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BRPranlukast

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0903酒石酸美托洛爾質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRMetoprolol tartrate

小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 MouseAlveolar：AlveolarMacrophages腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)阿格列汀;阿洛利停質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAlogliptin(SYR-322)

NP Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 莪術(shù)烯醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Curcumenol

小鼠前低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFPBYL719質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的PI3Kα抑制劑BYL-719

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 細(xì)胞，B16細(xì)胞 Pr-HNV8細(xì)胞，菜青蟲(chóng)卵巢細(xì)胞BYL719質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的PI3Kα抑制劑BYL-719

293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦAVRT752271質(zhì)量規(guī)格：>98%,鹽酸鹽形式,蛋白激酶抑制劑VRT-752271.HCl

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。