冷凍保存細(xì)胞之方法？
小鼠卵巢顆粒細(xì)胞 MouseOvary:NormalOvaryGranuleCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞 MouseOvary:NormalOvaryGranuleCells說(shuō)明書(shū)！

小鼠卵巢顆粒細(xì)胞 MouseOvary:NormalOvaryGranuleCells

     產(chǎn)品描述：主要功能為產(chǎn)生性激素，并且與相關(guān)的生長(zhǎng)因子相互作用促進(jìn)卵母細(xì)胞的發(fā)育。公司提供的小鼠卵巢顆粒細(xì)胞，采用膠原酶消化制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseOvaryPrimaCell:NormalOvaryGranuleCellsCatNo.3-4344)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠卵巢顆粒細(xì)胞傳3-5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
小鼠卵巢顆粒細(xì)胞 MouseOvary:NormalOvaryGranuleCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

大鼠*外分泌腺細(xì)胞;AR42J野馬追內(nèi)酯B（標(biāo)準(zhǔn)品）Eupalinolide B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

IL12B Others Human 人 IL12B / P40 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 長(zhǎng)春瑞濱（標(biāo)準(zhǔn)品）Vinorelbine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品，長(zhǎng)期不穩(wěn)定

真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)酒石酸長(zhǎng)春瑞濱（標(biāo)準(zhǔn)品）Vinorelbine tartrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

ERBB2 Others Cynomolgus 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硝呋太爾Nifuratel質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1硝呋太爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Nifuratel質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

CD40 Others Mouse 小鼠 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml，基體:HCI)Tellurium standard質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml，基體:HCI

MSTO-211H 人細(xì)胞株銩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體：10%HCL)Thulium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體：10%HCL

NCI-H1299人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：水)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：水

GRN Protein Mouse 重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體:1%HCI)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體:1%HCI

人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Ytterbium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0911硬脂酸單甘油酯(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGMS, glycerol monostearate

PTH Others Human 人 PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氯化金質(zhì)量規(guī)格：BCGold (III) chloride tetrahydrate

SD大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Neural stem cells in SD rat羥基脲質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRHydroxyurea/Hydroxycarbamide

SP20細(xì)胞，人細(xì)胞 圓弧青霉 人;HFL1羥基脲（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Hydroxyurea/Hydroxycarbamide

SW 982(人滑膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2枸櫞酸托瑞米芬質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Toremifene Citrate

小鼠卵巢顆粒細(xì)胞 MouseOvary:NormalOvaryGranuleCellsIGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)胡麻屬苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Sesamoside

HB611(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM葫蘆巴堿鹽酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Trigonelline Hydrochloride

腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)葫蘆素B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品Cucurbitacin B

ADRBK1 Others Human 人 GRK2 / ADRBK1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Quercitrin

雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12β-谷甾醇質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品β-Sitosterol

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。