冷凍保存細胞之方法？
人脂肪細胞 HumanFat:NormalAdiposeCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細人脂肪細胞 HumanFat:NormalAdiposeCells說明書！

人脂肪細胞 HumanFat:NormalAdiposeCells

     產(chǎn)品描述：人脂肪細胞分離自正常脂肪組織。體外培養(yǎng)的脂肪細胞起初為大小不一的圓形，胞內(nèi)大脂滴逐漸分成大小不一，數(shù)量不等的小脂滴，核/漿比例增大。細胞培養(yǎng)3-4天后貼壁較緊密，此時多數(shù)細胞為球形。之后，細胞質(zhì)邊緣開始變平、變鈍，向外凸出，其形態(tài)類似觸手，細胞外緣內(nèi)陷。6-7天后，細胞開始鋪展，在脂肪細胞周圍可以見到一些分化的小脂滴。培養(yǎng)9天后，多數(shù)脂肪細胞進一步增大，呈多邊形，胞漿豐富，含有大量的脂滴，脂滴富集于核周，形成“戒環(huán)樣”結(jié)構(gòu)，呈典型的成熟脂肪細胞的形態(tài)。脂肪組織是機體內(nèi)*的能量儲庫，也是人和動物機體重要的器官，是生命最基本的能量代謝方式。脂肪細胞的分化和增殖失?？梢鹬窘M織過多堆積，脂肪組織過多堆積會導(dǎo)致、抵抗的發(fā)生，是、Ⅱ型、和代謝障礙等的共同危險因素。了解脂肪細胞增殖分化規(guī)律是探討上述疾病機制必要的生物學(xué)基礎(chǔ)。公司提供的人脂肪細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)成人脂肪細胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準的方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品成人脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒(HumanFatPrimaCell:NormalAdiposeCellsCatNo.3-0603)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如纖維細胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，人脂肪細胞傳12代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度?？萍继峁┑募毎袠藴实蔫b定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標準。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人脂肪細胞 HumanFat:NormalAdiposeCells對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

OSMR Others Mouse 小鼠 OSMR / IL-31RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 陰丹酮Indanthrone質(zhì)量規(guī)格：

KB 人口腔上皮癌細胞久洛尼定(>97.0%(GC)(T))Julolidine質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)

MDA-MB-415人腺癌細胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+15%FBS9-醛基久洛尼定(>98.0%(GC))9-Julolidinecarboxaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標簽)9,10-菲醌(>99.0%(GC))9,10-Phenanthrenequinone質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)

小鼠少突膠質(zhì)前體細胞(MOPC)(5×105) Hep-2, 人細胞系 Human菲啶(>98.0%(GC))Phenanthridine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽)二乙二醇(標準品)Diethylene glycol質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)二乙二醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))Diethylene glycol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

人內(nèi)根殼細胞cDNAHHIRSC cDNA十二醇(標準品)1-Dodecanol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)

CLEC3B Others Human 人 CLEC3B / Teanectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 直接藍6(標準品)DIRECT BLUE 6質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

A9 小鼠皮下結(jié)締組織細胞分散橙37(標準品)Disperse Orange 37質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

Hepa1-6小鼠細胞 Mouse hepatoma cell line Hepa1-6 DMEM+10% FBS潑尼松龍（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Prednisolone

IFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (Fc 標簽)匹莫范色林；哌馬色林質(zhì)量規(guī)格：>98%,5-HT2A高效選擇性激動劑Pimavanserin;ACP-103

MDA-MB-157(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 R 1610(中國倉鼠體細胞)硫酸鉀鉻十二水質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRChromium(III) potassium sulfate, dodecahydrate

Ishikawa, 人細胞系硫酸鉻(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRChromium(III) sulfate, hydrate

ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸性紅B質(zhì)量規(guī)格：>60%,BSChromotrope FB

人脂肪細胞 HumanFat:NormalAdiposeCellsMAPK1 Others Mouse 小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 泊沙康唑-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口Posaconazole-d4

CL-0121Hut-102(人皮膚T細胞)5×106cells/瓶×2利福昔明標記d6質(zhì)量規(guī)格：美國進口Rifaximin - Labeled d6

U251人細胞 細胞，HEC-1B細胞 MDA-MB-468(癌細胞)羅匹尼羅N-氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進口Ropinirole N-Oxide

人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R3-氧羅匹尼羅鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口3-Oxo Ropinirole Hydrochloride

HA Others H7N7 甲型 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 比索洛爾質(zhì)量規(guī)格：美國進口Bisoprolol

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。復(fù)旦細胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細胞僅供科研使用。