冷凍保存細(xì)胞之方法？
人子宮頸上皮細(xì)胞 HumanCervix:NormalCervicalEpithelialCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人子宮頸上皮細(xì)胞 HumanCervix:NormalCervicalEpithelialCells說(shuō)明書(shū)！

人子宮頸上皮細(xì)胞 HumanCervix:NormalCervicalEpithelialCells

     產(chǎn)品描述：公司提供的人子宮頸上皮細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)人子宮頸上皮細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專(zhuān)利產(chǎn)品人子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanCervicalPrimaCell:NormalCervicalEpithelialCellsCatNo.3-0372)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人子宮頸上皮細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人子宮頸上皮細(xì)胞 HumanCervix:NormalCervicalEpithelialCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱(chēng)凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF玉米烯酮(>98% (HPLC),BC)Zearalenone from Giberella zeae質(zhì)量規(guī)格：>98% (HPLC),BC

NA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Babol/36/2005) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase/NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 堿式碳酸鋅Zinc carbonate basic質(zhì)量規(guī)格：BR

K562 人細(xì)胞硬脂酸鋅Zinc distearate質(zhì)量規(guī)格：BR

HeLa人細(xì)胞 Human cervix cancer HeLa cells DMEM+10% FBS氫氧化鋅(>98%,BR)Zinc hydroxide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)碘化鋅(>98%,BC)Zinc iodide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC

Hepa 1-6細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 PC-12(腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0923伏格列波糖（標(biāo)準(zhǔn)品）Voglibose質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)琥珀酸甲潑尼龍（標(biāo)準(zhǔn)品）Methylprednisolone hemisuccinate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

SK-Hep-1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL17RD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 六甲蜜胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Altretamine質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

人胚;MRC-5甲氧氯普胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Metoclopramide質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

IL10RB Others Rat 大鼠 IL10RB / IL10R2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 奧扎格雷鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Ozagrel Sodium質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用

人胚;HFL1L(+)-阿拉伯糖質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL(+)-Arabinose

狗腎細(xì)胞;Super Tube 胚胎成纖維細(xì)胞，3T6-Swiss albino細(xì)胞 Hed68細(xì)胞，果子貍腎上皮細(xì)胞去離子甲酰胺質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)Formamide deionized

人胚;WI-38 [WI38]聚酰胺粉(柱層析用，10-30目)質(zhì)量規(guī)格：柱層析用，10-30目Polyamide

HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 磷酸氫二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T))質(zhì)量規(guī)格：for HPLC, ≥99%(T)Sodium phosphate dibasic dihydrate

NeuroFectagen? 神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒無(wú)水硫酸鈉(農(nóng)殘級(jí))質(zhì)量規(guī)格：農(nóng)殘級(jí)Sodium sulfate anhydrous

人子宮頸上皮細(xì)胞 HumanCervix:NormalCervicalEpithelialCells胃粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)促腎上腺皮質(zhì)激素（1-13），人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRACTH (1-13), human

F7 Others Human 人 F7 / Coagulation Factor VII 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素（1-16），人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRACTH (1-16), human

NIH3T3 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素（1-17），人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRACTH (1-17), human

猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24), 人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRACTH (1-24), human

HNE2, 人細(xì)胞系垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27，人，小鼠，綿羊，豬，大鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。