冷凍保存細(xì)胞之方法？
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 HumanBrain:NormalNerveMicroglia冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 HumanBrain:NormalNerveMicroglia說明書！

人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 HumanBrain:NormalNerveMicroglia

     產(chǎn)品描述：人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞分離自正常人小腦組織，主要功能：（1）神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中。（2）當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞。（3）膠質(zhì)細(xì)胞能在II類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽性Ｔ細(xì)胞時表達(dá)抗原，能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用，并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。公司提供的人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanBrainPrimaCell:NormalNerveMicrogliaCatNo.3-0484)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞傳12代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 HumanBrain:NormalNerveMicroglia對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

GP120 Others HIV 人類病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp120 / SU 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))Methyl Stearate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24亞麻酸甲酯(>98.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))Methyl Linolenate質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亞油酸甲酯(>99.0%(GC)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))Methyl Linoleate質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

頜下腺上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)1-十一烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))1-Undecene質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

P3HR1細(xì)胞，人EBV陽性B細(xì)胞 大鼠*癌細(xì)胞株,DSL-6A/C1細(xì)胞 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-c cDNA1-十二烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))1-Dodecene 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA泛酸鈣,維生素B5D-Calcium Panthotenate 質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用

AR42J細(xì)胞，人*細(xì)胞 人皮膚成纖維細(xì)胞系,BJ細(xì)胞 小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]鹽酸特拉唑嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）Terazosin HCl質(zhì)量規(guī)格：含量測定

HT-29(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氯化鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Sodium chloride質(zhì)量規(guī)格：含量測定

Gibco 17105041 中性蛋白酶Dispase II, powder 5 g氨力農(nóng)（標(biāo)準(zhǔn)品）Amrinone質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定

人膀胱平滑肌細(xì)胞裂解物HBdSMCL更昔洛韋（標(biāo)準(zhǔn)品）Ganciclovir質(zhì)量規(guī)格：含量測定

EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼莫地平質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Nimodipine

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480]尼莫地平（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Nimodipine

tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3 胰凝乳蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL福辛普利鈉質(zhì)量規(guī)格：純度≥99.0%（HPLC）Fosinopril sodium

BxPC-3, 人原位*腺癌細(xì)胞株 Human呋塞米（速尿）質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRFurosemide

CD99 Others Mouse 小鼠 CD99 / PILR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 呋塞米（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Furosemide

人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 HumanBrain:NormalNerveMicroglia小鼠神經(jīng)皮質(zhì)細(xì)胞(MN-c)(1×106) LncaP, 人細(xì)胞 Human二氧化錫(> 99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：> 99%,BRTin (IV) oxide

豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1硫酸亞鈦(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTitanium (III) sulfate

FKBP7 Others Human 人 PPIase / FKBP7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫酸鈦(>96%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>96%,BRTitanium (IV) sulfate

人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL檸檬酸三丁酯(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTributyl citrate

HaCaT細(xì)胞，人正常皮膚細(xì)胞 柰瑟氏菌 小鼠樹突狀細(xì)胞低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP布地奈德-d8質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Budesonide-d8

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。