冷凍保存細(xì)胞之方法？
人淋巴成纖維細(xì)胞 HumanLymph:NormalLymphaticFibroblasts冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人淋巴成纖維細(xì)胞 HumanLymph:NormalLymphaticFibroblasts說明書！

人淋巴成纖維細(xì)胞 HumanLymph:NormalLymphaticFibroblasts

     產(chǎn)品描述：人淋巴成纖維細(xì)胞分離自正常人淋巴節(jié)，成纖維細(xì)胞是胚胎中胚層起源的間葉細(xì)胞。纖維原細(xì)胞分泌富含I和，或III型膠原的細(xì)胞外基質(zhì)。公司提供的人淋巴成纖維細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人淋巴成纖維細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanLymphPrimaCell:NormalLymphaticFibroblastsCatNo.3-0428)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人淋巴成纖維細(xì)胞傳10代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人淋巴成纖維細(xì)胞 HumanLymph:NormalLymphaticFibroblasts對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

HGFA Others Human 人 HGFA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 油酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.0%(GC))Methyl oleate質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.0%(GC)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1異丁香酚(正+反)(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析)Isoeugenol質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析

KIR2DL1 Others Human 人 KIR2DL1 / CD158a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 正壬烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC))Nonane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)

ACHN 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞1-萘酚(標(biāo)準(zhǔn)品)1-Naphthol質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

Hela-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 Hela-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human cervical cancer cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinN-二乙基亞硝胺(標(biāo)準(zhǔn)品)N-Nitrosodiethylamine質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

獼猴肌肉細(xì)胞;MMm7非那雄胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Finasteride質(zhì)量規(guī)格：含量測定

615小鼠狀肺腺株;P615 小鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氟羅沙星Fleroxacin質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 Mouse氟羅沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）Fleroxacin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

SFTPD Others Human 人 SFTPD / SP-D 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氟胞嘧啶/5-氟胞嘧啶Flucytosine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

人胚;HFL1氟胞嘧啶/5-氟胞嘧啶（標(biāo)準(zhǔn)品）Flucytosine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

TF Others Sus scrofa (Pig) 野豬 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲磺酸加貝酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Gabexate mesylate

大鼠雪旺氏細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL地塞米松,氟美松質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Dexamethasone

UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細(xì)胞 UMNSAH/DF-1 chicken embryo fibroblast DMEM培養(yǎng)基+10%FBS卡比多巴（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品(S)-Carbidopa

IFNW1 Protein Human 重組人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)醋酸氯地孕酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Chlormadinone Acetate

NCI-H209(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MRC-5(胚肺細(xì)胞)醋酸氯地孕酮質(zhì)量規(guī)格：>98%Chlormadinone Acetate

人淋巴成纖維細(xì)胞 HumanLymph:NormalLymphaticFibroblastsSERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 橙皮苷質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BRHesperidin

豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S3橙皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Hesperitin

CBLC Others Human 人 Cbl-c / CBL-3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 蟲草素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Cordycepin

腦動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)川陳皮素;蜜橘黃素質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BRNobiletin

人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 人正常胚，MRC-5細(xì)胞 SHZ-88(癌細(xì)胞)朝藿定A(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Epimedin A

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。