冷凍保存細(xì)胞之方法？
人內(nèi)皮細(xì)胞 HumanAortic:NormalAorticSmoothMuscleCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人內(nèi)皮細(xì)胞 HumanAortic:NormalAorticSmoothMuscleCells說明書！

人內(nèi)皮細(xì)胞 HumanAortic:NormalAorticSmoothMuscleCells

     產(chǎn)品描述：是供給血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于表面。內(nèi)皮細(xì)胞維持內(nèi)外的動態(tài)平衡，合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)，維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。公司提供的人內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanAorticPrimaCell:NormalAorticSmoothMuscleCellsCatNo.3-0232)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人內(nèi)皮細(xì)胞 HumanAortic:NormalAorticSmoothMuscleCells對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

豬小腸上皮細(xì)胞;ZYM-DIEC02正辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Octanoic acid質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十八烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Octadecane質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)

組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml仲辛醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-Octanol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

BS-C-1細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 人導(dǎo)管瘤細(xì)胞,UACC812細(xì)胞 人腦膜細(xì)胞裂解物HMCL二十八烷(standard for GC,≥98.5%(GC))Octacosane質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥98.5%(GC)

猴腎細(xì)胞;Vero IgCD4草酸(Standard for GC,≥99.6%)Oxalic acid dihydrate質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.6%

FBM細(xì)胞，胎兒骨髓間充質(zhì)細(xì)胞 *雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(拉祜族);KM9406復(fù)壁碳納米管 20-40nm(直徑),1-2μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled 20-40nm(diam.), 1-2μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

U14(小鼠子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>97%(TPO Method)

HT-29(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-N87 [N87]人細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYM復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),1-2μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 1-2μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2復(fù)壁碳納米管 60-100nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled 60-100nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,5-二芐氧基芐溴(>98.0%(GC)(T))3,5-Dibenzyloxybenzyl Bromide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)

大鼠腦成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液（100(20℃)μg/mL,基體: 1%HNO3）質(zhì)量規(guī)格：100(20℃)μg/mL,基體: 1%HNO3 Cobalt standard

Super Tube狗腎細(xì)胞 Super Tube canine kidney cells D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鏑標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mlDysprosium standard

IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Ierleukin-28B 蛋白 (His 標(biāo)簽)鉻黑T質(zhì)量規(guī)格：INDEriochrome black T

NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細(xì)胞)鉻藍(lán)黑R質(zhì)量規(guī)格：INDEriochrome® Blue Black R

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001B鉻藍(lán)黑B質(zhì)量規(guī)格：INDEriochrome® Blue Black B

人內(nèi)皮細(xì)胞 HumanAortic:NormalAorticSmoothMuscleCells小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1丹酚酸C（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Salvianolic acid C

PTPN12 Others Human 人 PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丹酚酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Salvianolic acid D

腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)膽固醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Cholesterol

散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21 人成纖維細(xì)胞，Hs 578Bst細(xì)胞 HO-8910PM(高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)膽固醇質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCholesterol

人結(jié)細(xì)胞;T84丹蒽醌（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定1,8-Dihydroxyanthraquinone

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。