冷凍保存細(xì)胞之方法？
人直腸平滑肌細(xì)胞 HumanRectum:NormalRectalSmoothMuscleCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人直腸平滑肌細(xì)胞 HumanRectum:NormalRectalSmoothMuscleCells說(shuō)明書(shū)！

人直腸平滑肌細(xì)胞 HumanRectum:NormalRectalSmoothMuscleCells

     產(chǎn)品描述：直腸平滑肌細(xì)胞提取于人直腸組織，是中基本的運(yùn)動(dòng)方式。時(shí)由于平滑肌特殊肌動(dòng)蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動(dòng)蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生，這進(jìn)一步證明了時(shí)的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性。公司提供的人直腸平滑肌原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)人直腸平滑肌原代細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專(zhuān)利產(chǎn)品人直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanRectumPrimaCell:NormalRectalSmoothMuscleCellsCatNo.3-0106)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人直腸平滑肌原代細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人直腸平滑肌細(xì)胞 HumanRectum:NormalRectalSmoothMuscleCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱(chēng)凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

HUASMC-c 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HUASMC) 500,000cells 胃黏膜上皮Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)左旋肉堿鹽酸鹽(>98%,BR)L-Carnitine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)左旋肉堿酒石酸鹽(>99%,BR)L-Carnitine L-tartrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

IL3 Others Human 人 IL-3 / Ierleukin-3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 碘化鉛(>98%,BR)Lead (II) iodide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1硬脂酸鉛Lead (II) stearate質(zhì)量規(guī)格：BR

3T3-Swiss albino細(xì)胞，胚胎成纖維細(xì)胞 人*癌細(xì)胞,CRL細(xì)胞 CM-M048小鼠腸巨噬細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL硫酸鉛(>99%,BC)Lead (II) sulfate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC

NCI-H345(懸浮) 小細(xì)胞高峰淀粉酶來(lái)源于米曲霉(4000U/g)Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 質(zhì)量規(guī)格：BR,4000u/g

NCI-N87 [N87]人細(xì)胞高峰淀粉酶來(lái)源于米曲霉(100U/mg )Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 質(zhì)量規(guī)格：BR,100 U/mg

人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞甘油醛-3-磷酸脫氫酶Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase質(zhì)量規(guī)格：BR,75U/MG

人惡性非霍奇金患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI] 人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL菠蘿蛋白酶Bromelain from pineapple stem 質(zhì)量規(guī)格：>500U/MG,BR

人胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293輔羧酶;羧化輔酶;焦磷酸硫胺素Thiamine pyrophosphate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

NCF2 Others Human 人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫代甜菜堿 12質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSulfobetaine 12,SDDAB

小氣道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)恩他卡朋;COMT抑制劑質(zhì)量規(guī)格：>99%,BREntacapone

獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4 人軟組織細(xì)胞，TE 115.T細(xì)胞 Eca-109(細(xì)胞)十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade)質(zhì)量規(guī)格：>95%,Tech GradeSodium dodecylbenzenesulfonate

人小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H209硅酸鈉九水(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRSodium silicate hydrate

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBluo-Gal

人直腸平滑肌細(xì)胞 HumanRectum:NormalRectalSmoothMuscleCellsCD48 Others Human 人 CD48 / BCM1 / SLAMF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 豆甾醇質(zhì)量規(guī)格：>90 %,GCStigmasterol

小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32豆甾醇質(zhì)量規(guī)格：>90%,GCStigmasterol

XCL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 XCL1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硝呋烯腙鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNitrovin HCL,Difurazone

CM-M041小鼠肝星形細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL杜鵑素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Farrerol

U-2 OS, 人細(xì)胞 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,LAN-6細(xì)胞 COS-7(SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞)丁香酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Syringic acid

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。