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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CS-E01742 |
檢測(cè)限 | 用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本 |
數(shù)量 | 39 |
檢測(cè)方法 | 夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法、捕獲法等 |
標(biāo)記物 | 血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等 |
樣本 | Rat cPLA2 ELISA Kit |
應(yīng)用 | 酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等 |
試劑準(zhǔn)備:
1. 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài)使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 |
大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài) | Rat cPLA2 ELISA Kit | 48T/96T |
大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài) Rat cPLA2 ELISA Kit
【實(shí)驗(yàn)用途】磷脂酶A2(phospholipase,PLA2)是存在于幾乎所有有核細(xì)胞的活性酶蛋白,是花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代謝的限速酶[1].PLA2分為依賴(lài)鈣離子的分泌型的PLA2(sPLA2)和胞漿型PLA2(cPLA2)及非鈣依賴(lài)型PLA2(iPLA2).而cPLA2又包括cPLA2α、cPLA2β、cPLA2γ、cPLA2δ。所提供的elisa檢測(cè)試劑盒是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定elisa檢測(cè)試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過(guò)PBS或TBS的徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
試劑配制:
1、大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài)酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項(xiàng):
1. 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測(cè)試劑盒哪里有賣(mài)試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無(wú)微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
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