公司采用的大鼠 8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）elisa檢測試劑盒說明書全是進口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，原裝進口抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

大鼠 8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）elisa檢測試劑盒說明書Rat 8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG ELISA Kit

【實驗用途】8-OHdG, 8-羥基脫氧鳥苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG）,8-OHdG是DNA氧化損傷的特異產(chǎn)物，是公認的內(nèi)源性及外源性因素對DNA氧化損傷的生物標志物。8-OHdG是DNA氧化損傷的主要產(chǎn)物之一。在復制過程中，DNA鏈上8-OHdG可以與C以外的其它堿基配對形成點突變，其中GC→TA突變的發(fā)生已為大量研究所證實，并被認為是氧化應激因素致癌、致突變的主要機理之一。機體修復機制正常時，8-OHdG可以在hOGG1等酶的作用下從DNA鏈上切除并重新?lián)饺胝５镍B嘌呤堿基，而切下的8-OHdG則可入血經(jīng)尿液排出體外。8-OHdG在體內(nèi)穩(wěn)定存在，一旦形成不再被機體進一步代謝，尿中8-OHdG含量與細胞內(nèi)DNA氧化損傷程度相關(guān)。所提供的elisa檢測試劑盒是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定elisa檢測試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經(jīng)過PBS或TBS的徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。

試劑準備：

1. 大鼠 8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）elisa檢測試劑盒說明書使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

試劑配制：

1、大鼠 8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）elisa檢測試劑盒說明書酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。

2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

注意事項：

1.大鼠 8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）elisa檢測試劑盒說明書試劑盒使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完，請廢棄。

2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應為室溫。

4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻Y(jié)果尤為重要，zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。

7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗結(jié)果。

8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時，請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。

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