抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. 新型血小板相關(guān)內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體費(fèi)用 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對(duì)生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：
英文名稱  Anti-SCUBE1 

中文名稱   新型血小板相關(guān)內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體費(fèi)用 

別    名  SCUB1_HUMAN; SCUBE 1; SCUBE1; Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 1.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    心 內(nèi)皮細(xì)胞

蛋白分子量  predicted molecular weight: 109kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SCUBE1 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

新型血小板相關(guān)內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體費(fèi)用 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 Could function as an adhesive molecule and its matrix bound and soluble fragments may play a critical role in vascular biology.

Subunit : Forms homooligomers and heterooligomers with SCUBE2 and SCUBE3.

Subcellular Location : Secreted. Cell membrane.

Tissue Specificity : Detected in endothelial cells. Highly expressed in platelets. Stored in platelet alpha granules, and transferrred to the cell surface upon activation and aggregation. A smaller form, probably produced by limited proteolysis, after being released from the storage granules, is associated with thrombus and localized with the subendothelial matrices in atherosclerotic plaques.

Similarity : Contains 1 CUB domain.

Contains 9 EGF-like domains.

抗體的鑒定：

1）新型血小板相關(guān)內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體費(fèi)用 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

甘露醇鹽瓊脂(新藥典)250g用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)

肌醇測(cè)定培養(yǎng)基 100(g) incubation media 肌醇測(cè)定培養(yǎng)基 100(g)

賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基 Lysine Decarboxylase Medium 5克 用于細(xì)菌賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)

酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂250用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定incubationmedia酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂250用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定

煌綠肉湯增菌液基礎(chǔ) 250g 用于蛋與蛋制品中沙門氏菌的增菌培養(yǎng)

甘酸培養(yǎng)基250g用于彎曲桿菌甘酸耐受性試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

布魯氏菌培養(yǎng)基抑菌劑 1ml*5 每支添加于200ml HB0315-1中

萘啶酮酸 10mg/支*5 每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標(biāo)準(zhǔn))

改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性分離，每升培養(yǎng)基中需添加2.5g苯乙醇及200mg環(huán)乙酰亞胺或30mg復(fù)達(dá)欣incubationmedia改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性分離，每升培養(yǎng)基中需添加2.5g苯乙醇及200mg環(huán)乙酰亞胺或30mg復(fù)達(dá)欣

VTMBroth

沙氏葡萄糖瓊脂(含氯霉素)250g用于霉菌和酵母菌的分離培養(yǎng)

MIO培養(yǎng)基 100(g) incubation media MIO培養(yǎng)基 100(g)

1% NaC1蔗糖發(fā)酵管 1% NaC1蔗糖發(fā)酵管 20支 BR

YPD瓊脂250用于測(cè)定酵母菌總數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaYPD瓊脂250用于測(cè)定酵母菌總數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))

Mueller-HintonAgar

CL-0208SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RAC1 Others Human 人 RAC1 / MIG5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人小膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHM cDNA

A549細(xì)胞，人 人低分化,SK-LU-1細(xì)胞 平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

PLAT Others Human 人 tPAβ 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

新型血小板相關(guān)內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體費(fèi)用CL-0207SHG-44 (人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PROCR Others Human 人 Epcr / PROCR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

小鼠食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

BNL CL.2小鼠胚胎肝細(xì)胞 BNL CL.2 mouse embryo liver cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

QSG-7701(人正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SK-N-SH(神經(jīng)母細(xì)胞瘤)