抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. 線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體費(fèi)用 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-SLC25A13 

中文名稱   線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體費(fèi)用 

別    名  ARALAR2; Calcium binding mitochondrial carrier protein Aralar2; Citrin; CTLN2; Ctrn; Mitochondrial aspartate glutamate carrier 2; RGD1565889; Solute carrier family 25 (citrin) member 13; Solute carrier family 25 member 13 (citrin); Solute carrier family 25 member 13; AI785475; CMC2_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域     細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 結(jié)合蛋白 線粒體

蛋白分子量  predicted molecular weight: 74kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SLC25A13 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體費(fèi)用 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 SLC25A13 is a member of the mitochondrial carrier family. It contains four EF-hand Ca(2+) binding motifs in the N-terminal domain, and localizes to mitochondria. It catalyzes the exchange of aspartate for glutamate and a proton across the inner mitochondrial membrane, and is stimulated by calcium on the external side of the inner mitochondrial membrane. Mutations in the SLC25A13 gene result in citrullinemia, type II. Multiple transcript variants encoding different isoforms have been found for this gene.

Function : Catalyzes the calcium-dependent exchange of cytoplasmic glutamate with mitochondrial aspartate across the mitochondrial inner membrane. May have a function in the urea cycle.

Subcellular Location : Mitochondrion inner membrane; Multi-pass membrane protein.

Tissue Specificity : High levels in liver and low levels in kidney, pancreas, placenta, heart and brain.

DISEASE : Defects in SLC25A13 are the cause of citrullinemia type 2 (CTLN2) [MIM:603471]. Citrullinemia belongs to the urea cycle disorders. It is an autosomal recessive disease characterized primarily by elevated serum and urine citrulline levels. Ammonia intoxication is another manifestation. CTLN2 is characterized by neuropsychiatric symptoms including abnormal behaviors, loss of memory, seizures and coma. Death can result from brain edema. Onset is sudden and usually between the ages of 20 and 50 years.

Defects in SLC25A13 are the cause of neonatal intrahepatic cholestasis due to citrin deficiency (NICCD) [MIM:605814]. NICCD is a form of citrullinemia type 2 with neonatal onset. NICCD is characterized by suppression of the bile flow, hepatic fibrosis, low birth weight, growth retardation, hypoproteinemia, variable liver dysfunction. NICCD is generally not severe and symptoms disappear by one year of age with an appropriate diet. Years or even decades later, however, some individuals develop the characteristic features of citrullinemia type 2 with neuropsychiatric symptoms.

Similarity : Belongs to the mitochondrial carrier family.

Contains 4 EF-hand domains.

Contains 3 Solcar repeats.

Citrin是一種線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體(Aspartate/ Glutamate Carrier, AGC)蛋白，在尿素循環(huán)及其他代謝過程中發(fā)揮重要作用。Citrin缺乏癥包含成年發(fā)作Ⅱ型 瓜氨酸血癥(Adult Onset Type Ⅱ Citrullinemia , CTLN2)和Citrin缺乏所致新生兒內(nèi)膽汁淤積癥( Neonatal Intrahepatic Cholestasis caused by Citrin Deficiency, NICCD)兩種不同表型，為常染色體隱性遺傳。

Citrin分子量約為74kDa，含675個(gè)氨基酸，在臟、*及中均有表達(dá)，位于線粒體內(nèi)膜。Citrin的N端有4個(gè)EF手型結(jié)構(gòu)域，可結(jié)合鈣離子，C端作為線粒體載體活性部位有6個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)。研究還發(fā)現(xiàn)，Citrin的類似物－Aralar，同為天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白，雖氨基酸序列與Citrin有77.8%的同源性，但組織分布明顯不同，Citrin主要在臟而Aralar 主要在骨骼肌和腦中表達(dá)，提示Citrin缺乏癥是一種局限于臟的疾病。

Citrin作為內(nèi)主要的天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白，其功能有3方面；

其一，將線粒體中天冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)至胞漿中，參與尿素、蛋白和核酸的合成。

其二，將天冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)至胞漿，作為蘋果酸/天冬氨酸穿梭的一個(gè)環(huán)節(jié)，將胞漿中糖酵解生成的NADH還原當(dāng)量運(yùn)至線粒體內(nèi)，參與能量、氨基酸、糖和脂代謝。

其三，在NADH形成及利用的同時(shí)促進(jìn)乳糖糖異生。

CTLN2患者多死于，機(jī)制尚不明確，高血氨并非*致病因素，局部缺血、能量耗竭、神經(jīng)毒性及代謝失調(diào)引起氧化應(yīng)激反應(yīng)，均可加速。CTLN2患者多并發(fā)臟，其中大部分為細(xì)胞 。體外研究提示瓜氨酸的積聚對細(xì)胞的增生有促進(jìn)作用，游離脂肪酸聚集造成的氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對發(fā)生也有重要作用。

抗體的鑒定：

1）線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體費(fèi)用 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

Anti-CNTFR Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記抗睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-p-Kinesin 5B/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化 Kinesin 5B 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CCDC52 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白52抗體 規(guī)格 0.2ml

HIF-2 Alpha (Hypoxia-inducible factor-2 Alpha) 缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗原 0.5mg

Histone H3 (Di Methyl K9) 英文名稱： 二甲基化組蛋白H3K9抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh SMYD4 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD4抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-p-Kinesin 5B/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化 Kinesin 5B 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-E.coli O139/Gold 膠體金離子標(biāo)記抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Metronidazole/FITC 熒光素標(biāo)記抗甲硝唑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C6orf192 8號染色體開放閱讀框192抗體 規(guī)格 0.2ml

CD62L (ELAM-1/L-Selectin ) L選擇素抗原 0.5mg

HN1L 英文名稱： 雄激素調(diào)節(jié)樣蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh SCNN1B/βENaC 上皮通道β抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Metronidazole/FITC 熒光素標(biāo)記抗甲硝唑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

IL-28(human Interleukin 28) ELISA Kit 人白介素28Multi-class antibodies規(guī)格： 96T

Anti-phospho-GCN2 (Thr667) 磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格 0.1ml

VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖 96T

Phospho-Rad17 (Ser645) 英文名稱： 磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體 0.1ml

CK42 英文名稱： 細(xì)胞角蛋白42 0.1ml

Anti-phospho-GCN2 (Thr667) 磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

ITGA6 & ITGB1 Others Human 人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人神經(jīng)束膜細(xì)胞總RNAHPC NA

SK-OV-3 人卵巢腺癌細(xì)胞

CL-0312293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞))5×106cells/瓶×2

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元

人上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B 人卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

CM-H020人胰島β細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

胰蛋白酶(含10mL 酶解緩沖液) 1mL

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin

IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) 細(xì)胞名稱 種屬

線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體費(fèi)用 CM-H019人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

HA Others H4N4 甲型 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL

Tca-8113-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人舌鱗癌細(xì)胞 Tca-8113-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma 1640+10% FBS

IL13 Protein Mouse 重組小鼠 IL13 / ALRH 蛋白

人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素(HEM)( 5×105 ) mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞 Mouse