抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. 跨膜蛋白TMED4抗體費(fèi)用 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-TMED4 

中文名稱   跨膜蛋白TMED4抗體費(fèi)用 

別    名  HNLF; Transmembrane emp24 domain containing protein 4; TMED4_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域     染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

蛋白分子量  predicted molecular weight: 23kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TMED4 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

跨膜蛋白TMED4抗體費(fèi)用 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 TMED4 is a putative NF-kB activating protein belonging to the EMP24/GP25L family, and contains 1 GOLD domain. It is also known as Transmembrane emp24 protein transport domain containing 4.

Function : Involved in vesicular protein trafficking, mainly in the early secretory pathway. targeting. Involved in the maintenance of the Golgi apparatus. Appears to play a role in the biosynthesis of secreted cargo including processing. Involved in endoplasmic reticulum stress response. May play a role in the regulation of heat-shock response and apoptosis

Subcellular Location : Endoplasmic reticulum membrane; Single-pass type I membrane protein

Similarity : Belongs to the EMP24/GP25L family.

Contains 1 GOLD domain.

抗體的鑒定：

1）跨膜蛋白TMED4抗體費(fèi)用 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

Anti-TTF-1/FITC 熒光素標(biāo)記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CASPASE3凋亡抑制劑 Anti-Z-DEVD-FMK 0.2ml

Smoothened 英文名稱： 跨膜蛋白Smoothened抗體 0.1ml

Epiphycan 英文名稱： 軟骨素蛋白多糖3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK alpha (Tyr463) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體 規(guī)格 0.1ml

Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Phospho-PKR (Thr446) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶R抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Monkey IgG (親和純化) 猴IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg

聚組氨酸抗體/抗His tag標(biāo)簽抗體 Anti-HisX6/6His/His tag 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG 兔抗豚鼠IgG 1mg

Fc ε RIα 英文名稱： FC段IgE受體α多肽抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Rictor (Thr1135) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體 規(guī)格 0.1ml

Monkey IgG (親和純化) 猴IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg

OAT-3(Organic anion transporter 3) 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CD45 CD45單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh P53 protein(wt-p53) 抑制基因P53蛋白抗體(野生型P53) 規(guī)格 0.1ml

ICAM1 Kit Rat 大鼠 ICAM-1 / CD54 ELISA配對抗體 ELISA

TSPAN5 英文名稱： 四分子交聯(lián)體5抗體(四旋蛋白) 0.2ml

C1RL 英文名稱： 補(bǔ)體C1RL鏈多肽抗體 0.2ml

Anti-CD45 CD45單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GBC-SD 人細(xì)胞

NA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

RKO人腺癌細(xì)胞 RKO human colon adenocarcinoma cells 1640+10%FBS

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926

人卵巢成纖維細(xì)胞(HOF) ( 5×105 ) NCI-N87 [N87]人細(xì)胞 Human

CL-0419QSG-7701(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CD3D Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

Raw-Blue小鼠單核細(xì)胞細(xì)胞 Monocytic leukemia cells of Raw-Blue mice DMEM+10% FBS,不能加雙抗+200μg/ml Zeocin

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

NCI-H838(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Hep G2(細(xì)胞)

跨膜蛋白TMED4抗體費(fèi)用 TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GBC-SD 人細(xì)胞

NA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

RKO人腺癌細(xì)胞 RKO human colon adenocarcinoma cells 1640+10%FBS

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926

人卵巢成纖維細(xì)胞(HOF) ( 5×105 ) NCI-N87 [N87]人細(xì)胞 Human