抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. TRIM35蛋白抗體說明書 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對(duì)生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-TRIM35 

中文名稱   TRIM35蛋白抗體說明書 

別    名  Hemopoietic lineage switch protein 5; HLS5; KIAA1098; Macrophage derived apoptosis inducing RBCC protein; MAIR; NC8; Protein MAIR; Protein Nc8; Tripartite motif containing 35; Tripartite motif containing protein 35; TRI35_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域     細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 57kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TRIM35 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

TRIM35蛋白抗體說明書 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 TRIM35 is a member of the tripartite motif (TRIM) family. The TRIM motif includes three zinc-binding domains, a RING, a B-box type 1, a B-box type 2 and a coiled-coil region. TRIM35 may play a role as a tumor suppressor and is implicated in the cell death mechanism. There are two named isoforms.

Function : May play a role as a tumor suppressor. Implicated in the cell death mechanism (By similarity).

Subcellular Location : Cytoplasm. Nucleus. Found predominantly in cytoplasm with a granular distribution. Found in punctuate nuclear bodies.

Similarity : Belongs to the TRIM/RBCC family.

Contains 1 B box-type zinc finger.

Contains 1 B30.2/SPRY domain.

Contains 1 RING-type zinc finger.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q9UPQ4.2

抗體的鑒定：

1）TRIM35蛋白抗體說明書 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

Anti-TRAF6 /FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子受體相關(guān)因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維受體-α 多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體 Anti-TRBF1 1ml

SRD*1 英文名稱： 類固醇5α還原酶1抗體(5α-Reductase 1) 0.1ml

ENTPD2 英文名稱： CD39樣蛋白1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化受體底物-1抗體 規(guī)格 0.1ml

RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維受體-α 多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-OXR /FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)小鼠抗兔IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

細(xì)胞角蛋白18抗體 Anti-CK18 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml

Phospho-c-Fos (Se*) 英文名稱： 磷酸化c-fos抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh PIWIL4 piwi樣4蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)小鼠抗兔IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

GABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

Anti-HER2/C-erbB-2 HER2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 規(guī)格 0.1ml

Antibody Diluent 抗體稀釋液 30ml

TWIST protein 英文名稱： TWIST蛋白抗體 0.1ml

C18orf56 英文名稱： 18號(hào)染色體開放閱讀框56抗體 0.1ml

Anti-HER2/C-erbB-2 HER2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

TGFB1 Protein Mouse 重組小鼠 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

AE-2 雜交瘤細(xì)胞抗 AChE

IFNA10 Others Human 人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

HuH-7人細(xì)胞 HuH-7 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS

二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-

人腎近端小管上皮細(xì)胞(HRPTEpiC) MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse

CM-H025人*上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

ART4 Others Rat 大鼠 ART4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

SK細(xì)胞，人細(xì)胞 狗腎細(xì)胞隆突型,MDCK superdome細(xì)胞 少突膠質(zhì)前體細(xì)胞培養(yǎng)基OPCM-prf

MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤) 5×106cells/瓶×2

Bcap-37(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R115大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16

TRIM35蛋白抗體說明書 TGFB1 Protein Mouse 重組小鼠 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

AE-2 雜交瘤細(xì)胞抗 AChE

IFNA10 Others Human 人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

HuH-7人細(xì)胞 HuH-7 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS

二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-

人腎近端小管上皮細(xì)胞(HRPTEpiC) MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse