抗體的生物素化標記實驗要點：

1. G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體品牌 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標記的效率,應(yīng)先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-TRIB1/GIG2 

中文名稱   G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體品牌 

別    名  Tribbles homolog 1;TRB-1;G-protein-coupled receptor-induced gene 2 protein;GIG-2;SKIP1; TRIB1_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Monkey 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    發(fā)育生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細胞 細胞凋亡 激酶和磷酸酶 細胞分化

蛋白分子量  predicted molecular weight: 41kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from Human TRIB1/GIG2 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體品牌 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 TRB-1 is a 372 amino acid protein that contains one protein kinase domain and belongs to the Ser/Thr protein kinase superfamily. Expressed ubiquitously with highest expression in bone marrow, thyroid gland, skeletal muscle and pancreas, TRB-1 interacts with MAPK kinases and is thought to regulate the activation of MAP kinses, possibly controlling MAP kinase cascades. The gene encoding TRB-1 maps to human chromosome 8, which consists of nearly 146 million base pairs, houses more than 800 genes and is associated with a variety of diseases and malignancies.

Function : Interacts with MAPK kinases and regulates activation of MAP kinases. May not display kinase activity.

Subcellular Location : cytoplasm.

Tissue Specificity : Expressed in most human tissues with the highest levels in skeletal muscle, thyroid gland, pancreas, peripheral blood leukocytes, and bone marrow.

Similarity : Belongs to the protein kinase superfamily. CAMK Ser/Thr protein kinase family. Tribbles subfamily.

Contains 1 protein kinase domain.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q96RU8.2

Trib1在脂肪組織維持和脂質(zhì)代謝紊亂上發(fā)揮關(guān)鍵作用;

巨噬細胞至少有兩個亞類，即M1型和M2型。M1型巨噬細胞參與促炎反應(yīng)，且在宿主防御細菌和感染中發(fā)揮核心作用。M2巨噬細胞與反應(yīng)、寄生蟲感染、組織重構(gòu)、纖維化以及發(fā)展相關(guān)。 Trib1是個銜接蛋白，與泛素連接酶COP1相互作用參與蛋白降解。人類全基因組關(guān)聯(lián)研究表明TRIB1參與脂質(zhì)代謝。

日前，大阪大學(xué)WPI免疫前沿研究中心等處的研究人員，發(fā)現(xiàn)Trib1對F4/80 + MR +組織內(nèi)在巨噬細胞的分化至關(guān)重要，且這些巨噬細胞和M2巨噬細胞、酸性粒細胞具有共同的特性(稱之為M2類巨噬細胞)。但是，Trib1在M1髓系細胞就不會發(fā)揮這種作用。相關(guān)研究成果刊登在近期出版的《自然》（Nature）雜志上。

Trib1缺陷導(dǎo)致各種器官中M2類巨噬細胞急劇減少，如骨髓、*、肺以及脂肪組織。在Trib1缺失的骨髓細胞中，C / EBP α的異常表達要為巨噬細胞分化缺陷負責(zé)。沒有想到的是，造血細胞缺乏 Trib1的小鼠，減少了脂肪組織塊，并伴隨著脂肪分解增加，即使是在正常飲食條件下。

M2類巨噬細胞的補充可緩解這種病理學(xué)現(xiàn)象。這表明，這類巨噬細胞的缺乏是引發(fā)脂肪分解的原因。為了應(yīng)對高脂肪飲食，造血細胞缺乏 Trib1的小鼠發(fā)育中會呈現(xiàn)高甘油三酯血癥、抗性，同時增加促炎細胞基因誘導(dǎo)。

這些結(jié)果表明Trib1在脂肪組織維持和脂質(zhì)代謝紊亂上發(fā)揮關(guān)鍵作用，而其作用是通過控制組織內(nèi)在M2類巨噬細胞的分化實現(xiàn)的。

抗體的鑒定：

1）G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體品牌 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。

Anti-TRH/FITC 熒光素標記促甲狀腺素釋放激素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CA15-3 peptide 癌相關(guān)抗原抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

阻抑基因1抗體 Anti-TSLC1 0.2ml

STIP1 英文名稱： 應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1抗體 0.2ml

Endomucin 英文名稱： 內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-IRAK1 (Thr387) 磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

CA15-3 peptide 癌相關(guān)抗原抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-TGF- Beta3/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)移生長因子–β3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

NIK，NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導(dǎo)的激酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

P物質(zhì)抗體 Anti-SP 0.1ml

5HT3C 英文名稱： 5-羥色胺受體3C抗體 0.1ml

eEF1A1 英文名稱： 翻譯延伸因子EF-1a抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAPK14(Thr180) 磷酸化p38MAPK抗體 規(guī)格 0.1ml

NIK，NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導(dǎo)的激酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

P73 protein P73抑制基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Angiotensin I 緊張素I抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-APP/ABPP(Tyr757) 磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Surfacant Protein A(100-200) 濃縮液 0.1ml 進口分裝

UBE2D2 英文名稱： 泛素蛋白連接酶D2抗體 0.2ml

DHRS9 英文名稱： 短鏈脫氫酶/還原酶家族9抗體 0.1ml

Anti-Angiotensin I 緊張素I抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白

IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

HMGB1 Others Mouse 小鼠 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照)

MGC80-3人細胞 Human gasic cancer cells MGC80-3 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

非洲綠猴腎細胞;VERO C1008 (E6)

人淋巴內(nèi)皮細胞 (HLEC)( 5×105 ) MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse

CM-H069人膀胱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL

CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人細胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細胞-深色素HEM-d

Hs 683細胞，人腦視神經(jīng)細胞 人癌細胞,MDA-MB-468細胞 動物上皮細胞培養(yǎng)基EpiCM-a

大額牛肺細胞;BFR-L1

LXN Others Human 人 Latexin / LXN / TCI 人細胞裂解液 (陽性對照)

G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體品牌 IL2 Protein Rat 重組大鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白

IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

HMGB1 Others Mouse 小鼠 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照)

MGC80-3人細胞 Human gasic cancer cells MGC80-3 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

非洲綠猴腎細胞;VERO C1008 (E6)

人淋巴內(nèi)皮細胞 (HLEC)( 5×105 ) MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse