抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. 睪丸特異表達(dá)新基因5抗體說(shuō)明書 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選最適條件；

3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對(duì)生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：
英文名稱  Anti-SRG5/SPATA12 

中文名稱   睪丸特異表達(dá)新基因5抗體說(shuō)明書 

別    名  Spermatogenesis-associated protein 12; Spermatogenesis associated 12; Spermatogenesis-related protein 5; SPT12_HUMAN; SPATA12; SRG5; Testis Spermatogenesis Related Gene5.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg

抗體來(lái)源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    細(xì)胞生物

蛋白分子量  predicted molecular weight: 20kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SPATA12 C-terminus 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

睪丸特異表達(dá)新基因5抗體說(shuō)明書 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 SPATA12, also known as SRG5 (Spermatogenesis-related protein 5), is a 190 amino acid protein that may be involved in the regulation of spermatogenesis. SPATA12 is expressed in normal adult testis, but is absent in fetal testis, implying that it may be involved in the development of testicular maturation. Specifically, SPATA12 is expressed in spermatocytes, spermatids and spermatozoa, with no expression in Leydig and Sertoli cells. Studies with HeLa and GC-1 germ cells indicate that expression of the SPATA12 gene may delay the progression of G1 to S in the cell cycle, therefore it is thought that SPATA12 maintains the cell in a differentiated state and suppresses cell proliferation.

Tissue Specificity : Expressed in testis.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q7Z6I5.1

抗體的鑒定：

1）睪丸特異表達(dá)新基因5抗體說(shuō)明書 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

Anti-TSARG4/FITC 熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體 Anti-VEGFR2/VEGF-R2/Flk1 0.1ml

SPAG17 英文名稱： 相關(guān)抗原17抗體 0.2ml

eIF3H 英文名稱： 真核翻譯起始因子3H抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKKi/IKKe(Thr500) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 規(guī)格 0.1ml

CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-HSP-90 Alpha/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記熱休克蛋白90α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

pig IgG (親和純化) 豬IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg

HLA-DR抗原抗體 Anti-HLA-DR 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine IgM 兔抗IgM 1mg

FGF5 英文名稱： 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子5抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-RGS19(Ser22) 磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格 0.1ml

pig IgG (親和純化) 豬IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg

Adipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Bad 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Ack1(Tyr284) 磷酸化Ack1抗體 規(guī)格 0.1ml

LRP/MVP 耐藥蛋白 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

ULBP3 英文名稱： UL16結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml

CHST3 英文名稱： 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶3抗體 0.1ml

Anti-Bad 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

IL23 Protein Marmoset 重組絨猴 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白

小鼠膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

4T1小鼠癌細(xì)胞 Mouse breast cancer cell 4T1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

CM-M094小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

SW 982(人滑膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A549(人)

CM-M036小鼠小腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

SELE Others Mouse 小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2

CaSKi細(xì)胞，人細(xì)胞 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,SMC細(xì)胞 人神經(jīng)細(xì)胞HN

Hep B1.2(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

hMNC-PB pooled Pellet 人類外周血單核細(xì)胞團(tuán)塊混合來(lái)源，超純 > 1 mio.cells 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞總RNAHUMSC NA

睪丸特異表達(dá)新基因5抗體說(shuō)明書 IL23 Protein Marmoset 重組絨猴 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白

小鼠膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

4T1小鼠癌細(xì)胞 Mouse breast cancer cell 4T1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

CM-M094小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

SW 982(人滑膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A549(人)