抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. 環(huán)指蛋白187抗體費(fèi)用 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-RNF187 

中文名稱   環(huán)指蛋白187抗體費(fèi)用 

別    名  E3 ubiquitin-protein ligase RNF187; Protein RNF187; RACO-1; RING domain AP1 coactivator 1; RING finger protein 187; RN187_HUMAN; RNF187.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    細(xì)胞生物 免疫學(xué)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 26kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF187 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

環(huán)指蛋白187抗體費(fèi)用 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 E3 ubiquitin-protein ligase that acts as a coactivator of JUN-mediated gene activation in response to growth factor signaling via the MAP3K1 pathway, independently from MAPK8.

Function : E3 ubiquitin-protein ligase that acts as a coactivator of JUN-mediated gene activation in response to growth factor signaling via the MAP3K1 pathway, independently from MAPK8.

Subunit : Interacts with JUN, independently of JUN phosphorylation.

Subcellular Location : Cytoplasm. Nucleus. Predominantly located in the cytoplasm. Shuttles between the cytoplasm and the nucleus.

Post-translational modifications : Ubiquitinated; undergoes 'Lys-48'-linked autoubiquitination in the absence of growth factors and MAP3K1-induced 'Lys-63'-linked polyubiquitination. 'Lys-48'-autoubiquitination leads to degradation by the proteasome, while MAP3K1-induced 'Lys-63'-linked polyubiquitination results in the stabilization of the protein. 'Lys-48'- and 'Lys-63'-linked polyubiquitinations occur most probably on the same 3 C-terminal lysine residues (Lys-195, Lys-223 and Lys-224) and are thus mutually exclusive. Other sites of ubiquitination are not excluded.

Similarity : Contains 1 RING-type zinc finger.

抗體的鑒定：

1）環(huán)指蛋白187抗體費(fèi)用 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse

Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser142) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格 0.1ml

總RNA抽提試劑 100ml 國產(chǎn)

ZA20D3 英文名稱： 鋅指蛋白20D3抗體 0.2ml

DLX2 英文名稱： 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX2抗體 0.2ml

SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse

Anti-SARS S-protein/FITC 熒光素標(biāo)記病毒表面蛋白S抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 海葵神經(jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg

基質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體 Anti-MMP-7 0.1ml

alpha-Synuclein (NT) 英文名稱： 核突觸蛋白-α抗體(N端) 0.1ml

FGF10 英文名稱： 成纖維細(xì)胞生長因子10抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PDGFRA(Tyr849)/PDGFRB(Tyr857) 磷酸化血小板源性生長因子受體α/β抗體 規(guī)格 0.1ml

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) ?？窠?jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg

SEPT10 英文名稱： 細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體 0.2ml

Phospho-HER4 (Tyr1258) 英文名稱： 磷酸化HER4抗體 0.1ml

14-3-3蛋白抗體(植物) Anti-14-3-3 family protein 0.1ml

Anti-VTN/FITC 熒光素標(biāo)記玻璃粘連蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-FXYD1 (Ser83) 磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體 規(guī)格 0.1ml

CK7(Cytokeratin 7)human 細(xì)胞角蛋白7抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

M14 人細(xì)胞

CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MDA-MB-468人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS

615小鼠株;Ca759

人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1 人肺微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

CL-0300NCI-H661(人大細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠*星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

A9小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 A9 mice subcutaneous connective tissue cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

IL1B Protein Rat 重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽)

NEC(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NIH/3T3(胚胎成纖維細(xì)胞)

環(huán)指蛋白187抗體費(fèi)用 FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

M14 人細(xì)胞

CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MDA-MB-468人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS

615小鼠株;Ca759

人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1 人肺微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL