抗體的生物素化標記實驗要點：

1. 環(huán)指蛋白133抗體規(guī)格 如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合；

7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-RNF133 

中文名稱   環(huán)指蛋白133抗體規(guī)格 

別    名  E3 ubiquitin protein ligase RNF133; MGC27072; Ring finger protein 133; RNF 133; RN133_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應   Human, Mouse, Rat 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領域    細胞生物 免疫學

蛋白分子量  predicted molecular weight: 42kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF133 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

環(huán)指蛋白133抗體規(guī)格 產(chǎn)品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 RNF133 contains a RING finger domain, a motif known to be involved in protein-protein and protein-DNA interactions. This gene has no intron. RNF133 may have E3 ubiquitin-protein ligase activity.

Function : Has E3 ubiquitin-protein ligase activity (By similarity).

Subcellular Location : Endoplasmic reticulum membrane; Single pass membrane protein.

Post-translational modifications : Auto-ubiquitinated (By similarity).

Similarity : Contains 1 PA (protease associated) domain.

Contains 1 RING-type zinc finger.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q8WVZ7.1

抗體的鑒定：

1）環(huán)指蛋白133抗體規(guī)格 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。

CXCR3/CD183 peptide 細胞表面趨化因子受體3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DIABLO SMAC / Diablo 兔單抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser495) 磷酸化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

非預染蛋白Marker分子量標準(3.4-100kDa) 2x250μl/100次 MBI原裝

ZBED4 英文名稱： 鋅指蛋白BED4抗體 0.2ml

Defensin alpha 4 英文名稱： 防御素α4抗體 0.1ml

DIABLO SMAC / Diablo 兔單抗 (FITC) Human

Anti-RRAD/FITC 熒光素標記RRAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SP (Substance P) P物質(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

擬南介金屬離子轉運蛋白抗體 Anti-Metal ion transporter 0.2ml

phospho-Smad3 (Ser204) 英文名稱： 磷酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體 0.1ml

Fascin-3 英文名稱： 肌動蛋白結合蛋白Fascin3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-PI3K p85/PIK3R1(Tyr368) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

SP (Substance P) P物質(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Sauvagine 英文名稱： 蛙皮降壓肽抗體 0.2ml

phospho-Ephrin B(Ser287) 英文名稱： 磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml

腺苷A2A受體抗體 Anti-A2AR/Adenosine A2A-R 0.1ml

Anti-WEE1 protein/FITC 熒光素標記WEE1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO4 (Ser193) 磷酸化叉頭蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml

AU1 tag peptide AU1 tag標簽多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

GREM1 Protein Mouse 重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標簽)

Lewis瘤

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

JAR人胎盤絨毛癌細胞 Human placeal villous carcinoma cells JAR DMEM+10%FBS

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3A1

人正常來源細胞 PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化) Rattus

CL-03142V6.11(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2

HA Others H7N7 甲型 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人小腦星形膠質細胞總RNAHA-c NA

J82細胞，細胞 人胚肺細胞,WI-38細胞 原代系膜細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml

豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4

WISP1 Others Human 人 WISP1 / CCN4 人細胞裂解液 (陽性對照)

環(huán)指蛋白133抗體規(guī)格 GREM1 Protein Mouse 重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標簽)

Lewis瘤

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

JAR人胎盤絨毛癌細胞 Human placeal villous carcinoma cells JAR DMEM+10%FBS

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3A1

人正常來源細胞 PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化) Rattus