抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. 受體表達(dá)蛋白5/相關(guān)蛋白抗體規(guī)格 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對(duì)生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-REEP5 

中文名稱   受體表達(dá)蛋白5/相關(guān)蛋白抗體規(guī)格 

別    名  C5orf18; DP1; Polyposis locus protein 1; Receptor expression enhancing protein 5; Receptor expression-enhancing protein 5; TB2; TB2 protein; D5S346;REEP5_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Pig, Horse 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域     細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號(hào)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 21kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human REEP5 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

受體表達(dá)蛋白5/相關(guān)蛋白抗體規(guī)格 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 REEP5 is a 189 amino acid multi-pass membrane protein. Thought to promote the functional cell surface expression of olfactory receptors, REEP5 belongs to the DP1 family and is encoded by a gene that maps to chromosome 5. With 181 million base pairs encoding around 1,000 genes, chromosome 5 is about 6% of human genomic DNA. Chromosome 5 is associated with Cockayne syndrome through the ERCC8 gene and familial adenomatous polyposis through the adenomatous polyposis coli (APC) tumor suppressor gene. Treacher Collins syndrome is also chromosome 5 associated and is caused by insertions or deletions within the TCOF1 gene. Deletion of the p arm of chromosome 5 leads to Cri du chat syndrome. Deletion of 5q or chromosome 5 altogether is common in therapy-related acute myelogenous leukemias and myelodysplastic syndrome.

Function : May promote functional cell surface expression of olfactory receptors.

Subunit : Interacts with ATL1 (By similarity). Interacts with ATL2.

Subcellular Location : Membrane; Multi-pass membrane protein (Potential).

Similarity : Belongs to the DP1 family.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q00765.3

抗體的鑒定：

1）受體表達(dá)蛋白5/相關(guān)蛋白抗體規(guī)格 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

phospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 磷酸化粘著斑激酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 Anti-Bim 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ECT2 (Thr790) 磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

暗室燈 個(gè)

ZNF148 英文名稱： 鋅指蛋白148抗體 0.2ml

DAPL1 英文名稱： 凋亡相關(guān)蛋白激酶樣蛋白1抗體 0.2ml

細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 Anti-Bim 0.1ml

Anti-TTF-1/FITC 熒光素標(biāo)記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CASPASE3凋亡抑制劑 Anti-Z-DEVD-FMK 0.2ml

Smoothened 英文名稱： 跨膜蛋白Smoothened抗體 0.1ml

Epiphycan 英文名稱： 軟骨素蛋白多糖3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK alpha (Tyr463) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體 規(guī)格 0.1ml

Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

ZWILCH 英文名稱： 著絲粒ZWILCH蛋白抗體 0.2ml

DEPDC1 英文名稱： 細(xì)胞周期調(diào)控蛋白SDP35抗體 0.1ml

α-甲基?；o酶A消旋酶抗體 Anti-AMACR/P504S 0.1ml

Anti-YBX-1/FITC 熒光素標(biāo)記高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-FAK(Ser722) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1) 趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標(biāo)簽)

HOS

SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

NCI-H460 [H460]人大細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H460 [H460] large cell lung cancer cell 1640+10% FBS

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO E6

大鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAc)(5×105) Ishikawa, 人細(xì)胞系 Human

CL-0379MCF 7B(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HDAC8 Others Human 人 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人心肌細(xì)胞-總RNAHCM-a NA

THP-1細(xì)胞，人單核細(xì)胞 人,H1299細(xì)胞 A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株

家貓腎細(xì)胞;CATK1

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

受體表達(dá)蛋白5/相關(guān)蛋白抗體規(guī)格 VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標(biāo)簽)

HOS

SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

NCI-H460 [H460]人大細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H460 [H460] large cell lung cancer cell 1640+10% FBS

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO E6

大鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAc)(5×105) Ishikawa, 人細(xì)胞系 Human