抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. RFESD蛋白抗體說明書 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時,或位于酶的催化位點(diǎn)時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-RFESD 

中文名稱   RFESD蛋白抗體說明書 

別    名  Rieske (Fe S) domain containing; Rieske domain containing protein; RFESD_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    細(xì)胞生物 免疫學(xué)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 18kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RFESD 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

RFESD蛋白抗體說明書 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 RFESD, also known as Rieske domain-containing protein, is a 157 amino acid protein that binds one 2Fe-2S cluster per subunit. Involved in metal ion binding, RFESD contains one Rieske domain. The RFESD gene is conserved in chimpanzee, dog, cow, mouse, rat, chicken and zebrafish, and maps to human chromosome 5q15. Chromosome 5 makes up approximately 6% of the human genome and contains 181 million base pairs, which encode 1,000 genes. Chromosome 5 is associated with Cockayne syndrome through the ERCC8 gene and familial adenomatous polyposis through the adenomatous polyposis coli (APC) tumor suppressor gene. Treacher Collins syndrome is caused by insertions or deletions within the TCOF1 gene and is also associated with chromosome 5. Deletion of 5q or chromosome 5 altogether is common in therapy-related acute myelogenous leukemias and myelodysplastic syndrome.

Similarity : Contains 2 Rieske domains.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q8TAC1.1

抗體的鑒定：

1）RFESD蛋白抗體說明書 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

β-酪蛋白(抗體)兔抗山羊、綿羊 Anti-Beta-casein 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

胎血清(特優(yōu)級) 500ml Hyclone

ZNF263 英文名稱： 鋅指蛋白263抗體 0.2ml

DYRK2 英文名稱： 雙特異性酪酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶DYRK2抗體 0.2ml

β-酪蛋白(抗體)兔抗山羊、綿羊 Anti-Beta-casein 0.1ml

Anti-Tubulin- Gamma/FITC 熒光素標(biāo)記微管蛋白-γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Tubulin-Alpha 微管蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

白細(xì)胞分化抗原CD2AP CD2AP 0.5mg

STAT5b 英文名稱： 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體 0.2ml

Enkephalin 英文名稱： 腦啡肽抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-IGF1R(Tyr1161) 磷酸化樣生長因子1受體抗體 規(guī)格 0.1ml

Tubulin-Alpha 微管蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

ZNF185 英文名稱： 鋅指蛋白185抗體 0.2ml

DHFRL1 英文名稱： 二氫葉酸還原酶樣1抗體 0.2ml

生成素-2抗體 Anti-ANG-2 hu, mo, rat, pig, dog, chi 0.1ml

Anti-ZNF217/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白217抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537) 磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml

CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 細(xì)胞色素P450 3A4抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

TNFSF8 Protein Human 重組人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Hep 3B 人細(xì)胞

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

SV-HUC-1人輸尿管上皮永生化細(xì)胞 SV-HUC-1 human ureter epithelial immortalized cell F12K培養(yǎng)基+10%FBS

斑馬魚尾鰭細(xì)胞;AB.9

大鼠背部脊髓神經(jīng)元(RDSCI)(1×106) Hela, 人細(xì)胞系 Human

CL-0391NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人羊膜上皮細(xì)胞總RNAHAmEpiC NA

SKBr-2HL細(xì)胞，人癌細(xì)胞 雞胚原代肝細(xì)胞,CEL細(xì)胞 SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系

MuM-2C(人眼脈絡(luò)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC pre-screened Pellet 人臍內(nèi)皮細(xì)胞(預(yù)選型) > 1 mio.cells 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM-acf

RFESD蛋白抗體說明書 TNFSF8 Protein Human 重組人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Hep 3B 人細(xì)胞

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

SV-HUC-1人輸尿管上皮永生化細(xì)胞 SV-HUC-1 human ureter epithelial immortalized cell F12K培養(yǎng)基+10%FBS

斑馬魚尾鰭細(xì)胞;AB.9

大鼠背部脊髓神經(jīng)元(RDSCI)(1×106) Hela, 人細(xì)胞系 Human