抗體的生物素化標記實驗要點：

1. 環(huán)指蛋白21抗體說明書 如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點可能因此被封閉,導致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結(jié)合；

7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-RNF21 

中文名稱   環(huán)指蛋白21抗體說明書 

別    名  IFP1; Interferon Responsive Finger Protein 1; Ring Finger Protein 21; Ring finger protein 21 interferon responsive; RNF21; TRIM 34; TRIM34; Tripartite motif containing protein 34; TRI34_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應   Human, Mouse, Rat, Pig 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    細胞生物 免疫學

蛋白分子量  predicted molecular weight: 57kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF21 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

環(huán)指蛋白21抗體說明書 產(chǎn)品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 Tripartite motif-containing protein 34 (TRIM34), also known as RING finger protein 21 (RNF21) or interferon-responsive finger protein 1 (IFP1), is a 488 amino acid member of the TRIM family, also known as the RING-B-box coiled-coil (RBCC) family. Members of the RBCC family have an N-terminal RING finger, followed by one or two zinc-binding domains (B-box domains), a leucine coiled-coil region and a variable C-terminal domain. Three isoforms of TRIM34 exist as a result of alternative splicing events. Isoform 1, the most abundant isoform, is highly expressed in placenta, spleen, colon and peripheral blood leukocytes. Studies have shown that Interferon (IFN) stimulation leads to an upregulation of TRIM34. These findings suggest that TRIM34 maybe a downstream effector that mediates IFN activities.

Tissue Specificity : Isoform 1 is the most abundant form. It is highly expressed in the placenta, spleen, colon and peripheral blood leukocytes.

Similarity : Belongs to the TRIM/RBCC family.

Contains 1 B box-type zinc finger.

Contains 1 B30.2/SPRY domain.

Contains 1 RING-type zinc finger.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q9BYJ4.2

抗體的鑒定：

1）環(huán)指蛋白21抗體說明書 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。

Gax(growth arrest-specific homeobox) 生長終止特異性同源盒基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

EPHB4 EphB4 兔單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh Phospho-DARPP32(Thr34) 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

非預染蛋白Marker分子量標準(10-200kDa) 2x250μl/100次 MBI原裝

ZNF307 英文名稱： 鋅指蛋白307抗體 0.2ml

DCTN6 英文名稱： 動力蛋白激活蛋白6抗體 0.2ml

EPHB4 EphB4 兔單抗 (PE) Human

FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

β-酪蛋白(抗體)兔抗山羊、綿羊 Anti-Beta-casein 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

胎血清(特優(yōu)級) 500ml Hyclone

ZNF263 英文名稱： 鋅指蛋白263抗體 0.2ml

DYRK2 英文名稱： 雙特異性酪酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶DYRK2抗體 0.2ml

β-酪蛋白(抗體)兔抗山羊、綿羊 Anti-Beta-casein 0.1ml

ZBTB5 英文名稱： 鋅指蛋白ZBTB5抗體 0.2ml

Dact2 英文名稱： Dapper2蛋白抗體 0.2ml

膜粘連蛋白 Ⅳ抗體 Anti-Annexin Ⅳ 0.1ml

Anti-ZW10 peptide/FITC 熒光素標記著絲粒蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204) 磷酸化原活化蛋白激酶ERK抗體 規(guī)格 0.1ml

DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結(jié)缺失基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標簽)

HCT-15 人結(jié)直腸腺癌細胞

LAMP2 Others Mouse 小鼠 LAMP2 / CD107b 人細胞裂解液 (陽性對照)

SK-NEP-1人腎母細胞瘤細胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBS

人胚腎細胞;2V6.11

大鼠腦膜細胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠細胞 Mouse

CL-0400NCI-H358(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2

ALCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小腦顆粒細胞RNAHCGC miRNA5 μg

MCF-7/ER36細胞，人癌細胞 小鼠瘤β細胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠，SV40巨T抗原),NIT-1細胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞

MKN-28(人高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪細胞培養(yǎng)基PAM

環(huán)指蛋白21抗體說明書 CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標簽)

HCT-15 人結(jié)直腸腺癌細胞

LAMP2 Others Mouse 小鼠 LAMP2 / CD107b 人細胞裂解液 (陽性對照)

SK-NEP-1人腎母細胞瘤細胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBS

人胚腎細胞;2V6.11

大鼠腦膜細胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠細胞 Mouse