產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-RNF149 

中文名稱   環(huán)指蛋白149抗體說明書 

別    名  DNA polymerase-transactivated protein 2; E3 ubiquitin-protein ligase RNF149; RING finger protein 149; RN149_HUMAN; Rnf149.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    細(xì)胞生物 免疫學(xué)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 40kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF149 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

環(huán)指蛋白149抗體說明書 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 The RING-type zinc finger motif is present in a number of viral and eukaryotic proteins and is made of a conserved cysteine-rich domain that is able to bind two zinc atoms. Proteins that contain this conserved domain are generally involved in the ubiquitination pathway of protein degradation. RNF149 (RING finger protein 149), also known as DNAPTP2 (DNA polymerase-transactivated protein 2) or E3 ubiquitin-protein ligase RNF149, is a 400 amino acid single-pass membrane protein that contains one PA (protease associated) domain and a single RING-type zinc finger. The gene encoding RNF149 maps to human chromosome 2, which consists of 237 million bases, encodes over 1,400 genes and makes up approximately 8% of the human genome. A number of genetic diseases are linked to genes on chromosome 2 including Harlequin icthyosis, sitosterolemia and Alstr鰉 syndrome.

Function : E3 ubiquitin-protein ligase. Ubiquitinates BRAF, inducing its proteasomal degradation.

Subcellular Location : Membrane.

Similarity : Contains 1 PA (protease associated) domain.

Contains 1 RING-type zinc finger.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q8NC42.2

GADD153(Growth arrest and DNA damage-inducible 153) 生長抑制DNA損傷基因153抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CLU Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J 鼠單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh Phospho-DBC1 (Thr454) 磷酸化缺失基因1抗體 規(guī)格 0.1ml

尼龍膜(帶正電荷)(15×20cm 0.45um) 1張 Amersham

ZNF354C 英文名稱： 鋅指蛋白354C抗體 0.2ml

CD229 英文名稱： CD299抗體 0.2ml

CLU Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J 鼠單抗 (PE) Human

fPSA ELISA Kit 大鼠游離特異性抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

多抗 多抗Multi-class antibodies規(guī)格：

Rhesus antibody Rh Frizzled 7/FZE3 卷曲蛋白FZD7抗體 規(guī)格 0.1ml

ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 小鼠抗激素/加壓素/精酸加壓素 96T

NKB 英文名稱： 神經(jīng)激肽B抗體 0.2ml

AFM 英文名稱： Alpha清蛋白抗體 0.2ml

多抗 多抗Multi-class antibodies規(guī)格：

phospho-ZAP70 (Tyr292) 英文名稱： 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml

DOK4 英文名稱： 對接蛋白4抗體 0.2ml

凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端) Anti-Apaf-1 0.1ml

Anti-HBcAg/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人核心抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Ephrin B(Ty*9) 磷酸化Ephrin B抗體 規(guī)格 0.1ml

DHAV(duck hepatitis A virus) 鴨A病毒抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

TNFSF11 Protein Mouse 重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HAL-01 人急性混合型細(xì)胞

CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HCT-8 [HRT-18]人回盲細(xì)胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T

人肺間充質(zhì)干細(xì)胞(肺)(HPMSC)(5×105) U251人細(xì)胞 Human

CL-0408NEC(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-sp miRNA5 μg

MCF-7(OLD)細(xì)胞，人癌細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,RenCa細(xì)胞 HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞

MDA-MB-468(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC Growth Medium 2single donor Pellet #N/A > 1 mio.cells 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基CM

環(huán)指蛋白149抗體說明書 TNFSF11 Protein Mouse 重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HAL-01 人急性混合型細(xì)胞

CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HCT-8 [HRT-18]人回盲細(xì)胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T

人肺間充質(zhì)干細(xì)胞(肺)(HPMSC)(5×105) U251人細(xì)胞 Human

抗體的生物素化標(biāo)記實驗要點：

1. 環(huán)指蛋白149抗體說明書 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

抗體的鑒定：

1）環(huán)指蛋白149抗體說明書 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。