抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. E3泛素蛋白連接酶144A抗體費(fèi)用 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-RNF144 

中文名稱   E3泛素蛋白連接酶144A抗體費(fèi)用 

別    名  Probable E3 ubiquitin protein ligase RNF144A; Probable E3 ubiquitin-protein ligase RNF144A; R144A_HUMAN; Ring finger protein 144; RING finger protein 144A; RNF 144; RNF 144A; RNF144A; UBCE7IP4; UbcM4 interacting protein 4; UbcM4-interacting protein 4; Ubiquitin conjugating enzyme 7 interacting protein 4; Ubiquitin-conjugating enzyme 7-interacting protein 4.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 33kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF144 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

E3泛素蛋白連接酶144A抗體費(fèi)用 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 E3 ubiquitin-protein ligase which accepts ubiquitin from E2 ubiquitin-conjugating enzymes UBE2L3 and UBE2L6 in the form of a thioester and then directly transfers the ubiquitin to targeted substrates.

Function : E3 ubiquitin-protein ligase which accepts ubiquitin from E2 ubiquitin-conjugating enzymes UBE2L3 and UBE2L6 in the form of a thioester and then directly transfers the ubiquitin to targeted substrates (By similarity).

Subunit : Interacts with UBE2L3.

Subcellular Location : Membrane; Single-pass membrane protein (Potential).

Similarity : Belongs to the RBR family. RNF144 subfamily.

Contains 1 IBR-type zinc finger.

Contains 2 RING-type zinc fingers.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P50876.2

抗體的鑒定：

1）E3泛素蛋白連接酶144A抗體費(fèi)用 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人磷酸化雌激素受體α多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1016) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

Neurobasal Medium 500ml Gibco

ZNF516 英文名稱： 鋅指蛋白516抗體 0.2ml

DR4/ 英文名稱： 死亡受體4抗體 0.1ml

自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 0.1ml

ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 磷酸化雌激素受體α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

極光激酶B抗體 Anti-Aurora B 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Thr693) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

D-MEM/F-12培養(yǎng)基(原裝) 10×1L Gibco

ZNF532 英文名稱： 鋅指蛋白532抗體 0.2ml

DR3 英文名稱： 死亡受體3抗體 0.1ml

極光激酶B抗體 Anti-Aurora B 0.1ml

ZSWIM2 英文名稱： E3泛素蛋白連接酶ZSWIM2抗體 0.2ml

DUSP7 英文名稱： 雙特異性蛋酸酶7抗體 0.2ml

N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 Anti-APNG/MPG 0.1ml

Anti- Alpha-AF/ Alpha-Afa/FITC 熒光素標(biāo)記α-L-阿拉伯糖苷酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596) 磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體 規(guī)格 0.1ml

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

FaDu 人咽鱗癌細(xì)胞

Spike Others Human coronavirus 人冠狀病毒 spike glycoprotein (aa 1-760) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS

人惡性多發(fā)性;ERA-2

人卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞(HOMEC) ( 5×105 ) Saos-2，人成細(xì)胞 Human

CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CD40LG Others Canine 狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人基質(zhì)細(xì)胞RNAHHGMC miRNA5 μg

兔腎細(xì)胞;RK-13 細(xì)胞，KG-1細(xì)胞 MFC-GFP細(xì)胞，綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前細(xì)胞

人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

E3泛素蛋白連接酶144A抗體費(fèi)用 TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

FaDu 人咽鱗癌細(xì)胞

Spike Others Human coronavirus 人冠狀病毒 spike glycoprotein (aa 1-760) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS

人惡性多發(fā)性;ERA-2

人卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞(HOMEC) ( 5×105 ) Saos-2，人成細(xì)胞 Human