抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1. 癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab25抗體說明書 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對(duì)生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-Rab25 

中文名稱   癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab25抗體說明書 

別    名  CATX 8; CATX-8; CATX8; member RAS oncogene family; RAB25; RAB-25; RAB25_HUMAN; Ras related protein Rab 25; Ras-related protein Rab-25.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域     信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 細(xì)胞生物標(biāo)志物 G蛋白信號(hào)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 23kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Rab25 (145-190aa) 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab25抗體說明書 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 RAB proteins, such as RAB25, are members of the RASsuperfamily of small GTPases that are involved in membranetrafficking. Members of the RAB11 subfamily, including RAB25,control the return of internalized membrane-associated moieties tothe cell surface

Function : Involved in the regulation of cell survival. Promotesinvasive migration of cells in which it functions to localize andmaintain integrin alpha-V/beta-1 at the tips of extendingpseudopodia. Increases the rates of ovarian and breast cancersprogression and aggressiveness by modulating cellular processessuch as proliferation, survival and migration of epithelial tumorcells. May selectively regulate the apical recycling pathway.Together with MYO5B regulates transcytosis

Subunit : Interacts with RAB11FIP1, RAB11FIP2, RAB11FIP3 andRAB11FIP4. Interacts (via the hypervariable C-terminal region) withITGB1 (via the cytoplasmic region); the interaction isGTP-dependent. Interacts with ITGAV. Associates with the integrinalpha-V/beta-1 heterodimer.

Subcellular Location : Cell membrane; Lipid-anchor; Cytoplasmicside (Potential). Cell projection, pseudopodium membrane.Cytoplasmic vesicle. Note=Colocalizes with integrin alpha-V/beta-1in vesicles at the pseudopodial tips.

Tissue Specificity : Expressed in ovarian epithelium (NOE) andbreast tissue. Expressed in ovarian cancer; expression is increasedrelative to NOE cells. Expression in ovarian cancer is stagedependent, with stage III and stage IV showing higher levels thanearly stage cancers. Expressed in breast cancer; expression isincreased relative to normal breast tissue.

Similarity : Belongs to the small GTPase superfamily. Rab family.

抗體的鑒定：

1）癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab25抗體說明書 抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

IFN- Omega (Human Interferon Omega ,IFN- Omega ) ELISA Kit 人ω干擾素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解素 96T

S100A7 英文名稱： S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體 0.2ml

CCDC125 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體 0.2ml

Anti-Phospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

anti-RAP1A/FITC 熒光素標(biāo)記抗Rap1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Beta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)(多肽蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg

瘦素抗體 Anti-Leptin 0.2ml

SV2A 英文名稱： 突觸泡蛋白2A抗體 0.2ml

FREAC3 英文名稱： 叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體 規(guī)格 0.1ml

Beta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)(多肽蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg

PKB (Rat) 大鼠蛋白激酶BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MyoGEF 肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 規(guī)格 0.2ml

Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白j鏈 96T

SPOP 英文名稱： SPOP蛋白抗體 0.2ml

CCKBR 英文名稱： 促胃泌素受體抗體 0.1ml

Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

EGMedium

GN增菌液 Gram Negative Enrichment Broth 主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

HAT混合鹽 HAT Media Supplement (50×) Hybri-Max? 1vail γ射線滅菌

PYG液體培養(yǎng)基250g/瓶用于雙歧桿菌乙酸和乳酸代謝物測定，每培養(yǎng)基中添加30支2incubationmediaPYG液體培養(yǎng)基250g/瓶用于雙歧桿菌乙酸和乳酸代謝物測定，每培養(yǎng)基中添加30支21319

m-EndoAgar，LES

SabouraudDextroseAgar

克氏枸櫞酸鹽培養(yǎng)基 250(g) incubation media 克氏枸櫞酸鹽培養(yǎng)基 250(g)

3.5% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管 3.5% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管 20支 BR

液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)250用于混濁制品需氧菌無菌試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)250用于混濁制品需氧菌無菌試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

Mueller-Hinton瓊脂(MHA) 250g 用于彎曲桿菌的藥物敏感性試驗(yàn)

癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab25抗體說明書 李氏增菌肉湯1  規(guī)格：  225ml/X10袋  用途：  用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。

3%堿性蛋白胨水  規(guī)格：  225ml/X10袋  用途：  用于嗜鹽性細(xì)菌特別是副溶血性弧菌及弧菌的前增菌培養(yǎng)。

SC增菌液  規(guī)格：  225ml/X10袋  用途：  用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。

TCBS瓊脂培養(yǎng)基平板  規(guī)格：  90mmX20個(gè)  用途：  用于腸道致病性弧菌特別是霍亂弧菌和副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。（GB、美國FDA、SN、ISO）