抗體的生物素化標(biāo)記實驗要點：

1. 前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體說明書 如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-Porimin 

中文名稱   前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體說明書 

別    名  KCT3; Keratinocytes associated transmembrane protein 3; Pro oncosis receptor inducing membrane injury; Serine/threonine rich receptor; TMEM123; Transmembrane protein 123; PORIM_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領(lǐng)域    細(xì)胞生物 細(xì)胞凋亡 激酶和磷酸酶 細(xì)胞膜受體

蛋白分子量  predicted molecular weight: 19kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Porimin (159-166aa). 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體說明書 產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 This gene encodes a highly glycosylated transmembrane protein with a high content of threonine and serine residues in its extracellular domain, similar to a broadly defined category of proteins termed mucins. Exposure of some cell types to anti PORIMIN (pro oncosis receptor inducing membrane injury) antibody, crosslinks this protein on the cell surface and induces a type of cell death termed oncosis. Oncosis is distinct from apoptosis and is characterized by a loss of cell membrane integrity without DNA fragmentation. This gene product is proposed to function as a cell surface receptor that mediates cell death.

Function : Implicated in oncotic cell death, characterized by cell swelling, organelle swelling, vacuolization and increased membrane permeability.

Subcellular Location : Membrane; Single-pass type I membrane protein.

Tissue Specificity : Ubiquitous. Not expressed in ovary. Expressed in keratinocytes.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q8N131.1

抗體的鑒定：

1）前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體說明書 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。

Anti-E.coli O139/FITC 熒光素標(biāo)記抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-MRP5/ABCC5/FITC 熒光素標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C1orf93 1號染色體開放閱讀框93抗體 規(guī)格 0.2ml

E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein) DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白 0.5mg

HPV16 L2 英文名稱： 人瘤病毒16型L2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Runx3 Runx3抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-MRP5/ABCC5/FITC 熒光素標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

TCC C5b-9 ELISA Kit 大鼠末端補體復(fù)合物C5b-9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser31) 磷酸化酪氨酸羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh GDF3 生長分化因子3抗體 規(guī)格 0.1ml

TNFsR- II (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT 小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ 96T

NARG2 英文名稱： 谷酸受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體 0.2ml

ANKHD1 英文名稱： 病毒制約錨定蛋白抗體 0.2ml

Anti-Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser31) 磷酸化酪氨酸羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

GAL(Human galanin) ELISA Kit 人甘丙肽/甘丙素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Leptin 瘦素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh KMT1A/SUV39H1 組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 規(guī)格 0.2ml

LN ELISA Kit 大鼠層連蛋白/板層素 96T

Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771) 英文名稱： 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 0.1ml

CADPS2 英文名稱： 鈣依賴分泌激活蛋白2/的相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

Anti-Leptin 瘦素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

CL-0391NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人羊膜上皮細(xì)胞總RNAHAmEpiC NA

SKBr-2HL細(xì)胞，人癌細(xì)胞 雞胚原代肝細(xì)胞,CEL細(xì)胞 SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系

MuM-2C(人眼脈絡(luò)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC pre-screened Pellet 人臍內(nèi)皮細(xì)胞(預(yù)選型) > 1 mio.cells 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM-acf

CL-0389NCI-H1688(人典型小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

S100A4 Others Mouse 小鼠 S100A4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人無色素睫狀上皮細(xì)胞總RNAHNPCEpiC NA

大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1 大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞，A10細(xì)胞 BNL1ME A.7R.1細(xì)胞，BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞

人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體說明書 IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-

CL-0205Sf-9(昆蟲細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Dami細(xì)胞，巨核細(xì)胞 人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38

A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)