抗體的生物素化標記實驗要點：

1. 磷酸二酯酶4A8抗體說明書 如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合；

7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

產(chǎn)品訂購信息：
英文名稱  Anti-PDE4A8 

中文名稱   磷酸二酯酶4A8抗體說明書 

別    名  2EL; DPDE2; PDE4; PDE46; PDE4A; Phosphodiesterase 4A; Phosphodiesterse Type 4A8; PDE4A_HUMAN.

濃    度   1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源   Rabbit

克隆類型   polyclonal

交叉反應   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep 

產(chǎn)品類型   一抗  

研究領域    細胞生物 信號轉導 細胞周期蛋白 細胞分化

蛋白分子量  predicted molecular weight: 98kDa

性    狀   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PDE4A8 

亞    型   IgG

純化方法   affinity purified by Protein A

儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

磷酸二酯酶4A8抗體說明書 產(chǎn)品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:20-100 IF=1:50-200

（石蠟切片需做抗原修復） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

產(chǎn)品介紹 The PDE4A8 is a testis germ cell-specific PDE4A variant. There are two PDE4A variants identified in rat testis (PDE4A8 and an un-characterized 76 kDa PDE4A protein). Spermatogenesis is accompanied by expression of a varied repertoire of PDE4 enzymes at different stages of cell differentiation that presumably perform specialized functions. Confocal microscopic examination revealed the presence of PDE4A8 in primary and secondary spermatids but not in mature spermatozoa. PDE4A8 inhibition results in increased apoptosis of the germ cells accompanied with reduction in the number of mature spermatozoa.

Function : Hydrolyzes the second messenger cAMP, which is a keyregulator of many important physiological processes.

Subunit : Isoform 1 interacts with LYN. Isoform 2 and isoform 6interact weakly with LYN. Isoform 1, isoform 2 and isoform 6interact with ARRB2.

Subcellular Location : Isoform 1: Cytoplasm, perinuclear region.

Post-translational modifications : Phosphorylation by MAPKAPK2 its activation through PKAphosphorylation (By similarity). Phosphorylated at Ser-686 andSer-688 when expressed in S.frugiperda cells. Isoform 2 and isoform7 are activated by phosphorylation at Ser-119 and Ser-123respectively by PKA.

Proteolytically cleaved by caspase-3.

Similarity : Belongs to the cyclic nucleotide phosphodiesterasefamily. PDE4 subfamily.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P27815.3

抗體的鑒定：

1）磷酸二酯酶4A8抗體說明書 抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。

2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。 

如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。

3）抗體親和力：是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。

Anti-Crk p38 /CI/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠Crk p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-NFATc1/FITC 熒光素標記活化T細胞核因子1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C10orf81 10號染色體開放閱讀框81抗體 規(guī)格 0.2ml

NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 合成酶-3(抗原) 0.5mg

HPV18 E6 protein 英文名稱： 人類狀瘤病毒18 E6抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh RNF156 環(huán)指蛋白156抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-NFATc1/FITC 熒光素標記活化T細胞核因子1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-CITED1/ABCC1/FITC 熒光素標記結合轉化激活因子CITED1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ty*0) /FITC 熒光素標記磷酸化馬鈴薯球蛋白(性硬化)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh 5 lipoxygenase/ALOX5 5-脂氧合酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/APC APC標記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

GRK3 英文名稱： β能受體激酶2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PSRC1 富含脯氨酸/絲氨酸卷曲螺旋蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ty*0) /FITC 熒光素標記磷酸化馬鈴薯球蛋白(性硬化)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Ntn4(Human Netrin-4) ELISA Kit 人軸突生長誘向因子4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HPL/PL 人胎盤泌乳素抗體 規(guī)格 0.1ml

HIF-1 Alpha(Mouse hypoxia-inducible factor 1 Alpha)ELISA Kit 小鼠低氧誘導因子1α 96T

Phospho-PKR (Thr451) 英文名稱： 磷酸化蛋白激酶R抗體 0.1ml

C19orf75 英文名稱： 19號染色體開放閱讀框75抗體 0.1ml

Anti-Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

CL-0383MDA-MB-436(人癌細胞)5×106cells/瓶×2

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人細胞裂解液 (陽性對照)

人角膜上皮細胞總RNAHCEpiC NA

ZR75-1細胞，人癌細胞 129小鼠ES細胞,D3細胞 WM35, 人細胞

MV3(人細胞) 5×106cells/瓶×2

HUAEC Pellet 人臍動脈內皮細胞團塊 > 1 mio.cells 神經(jīng)細胞培養(yǎng)基NM-prf

CL-0381MDA-MB-175VII(人導管癌細胞)5×106cells/瓶×2

LIPF Others Human 人 Gasic lipase / LIPF 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人心肌細胞-心室總RNAHCF-av NA

大耳山羊腎細胞;LDG-2 皮下結締組織細胞，A9細胞 CT26.WT[CT26WT]細胞，小鼠細胞

人胚肺二倍體細胞;KMB-17

HA Others H11N2 甲型 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

磷酸二酯酶4A8抗體說明書 PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照)

615小鼠株;Ca763

Calu-1 人細胞

CFPAC-1人*癌細胞 Human pancreatic cancer cell line CFPAC-1 IMDM(GIBCO)+10%FBS

BMP5 Protein Human 重組人 BMP-5 蛋白 (Fc 標簽)

人肝星形細胞 (HHSteC)( 5×105 ) COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞 其它